B淋巴细胞刺激因子(BLyS)与实验性重症肌无力动物模型的相关性研究

来源 :南京师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:trittt
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本文通过建立实验性自身免疫性重症肌无力动物(experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG)模型,利用抗BLyS抗体在EAMG模型建立前的预防和建立后的治疗试验,检测了抗BLyS抗体在EAMG中的预防和治疗作用,并初步探索了抗BLyS抗体在EAMG中的作用机理。结果如下: 1 实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)动物模型的建立与鉴定 用烟碱型乙酰胆碱受体α1亚单位125~149多肽片段和鼠伤寒沙门氏裸菌免疫C57BL/6小鼠,观察小鼠的临床症状、抗体滴度、游泳疲劳时间及肌电图变化。结果表明:大部分模型组小鼠强化接种后出现轻微肌无力症状,级别评定为1分;模型组小鼠的抗体滴度与正常对照组小鼠差异显著,20只模型组小鼠中有12只的抗体滴度为阳性;游泳试验中有18只小鼠呈阳性;肌电图检查中所有小鼠均为阳性,最大衰减幅度达82%。提示:成功建立了EAMG模型,为进一步研究EAMG的发病机理打下了基础。 2 抗BLyS和BSA多克隆抗体的制备和纯化 选取2-3kg的雄性日本大耳白兔,分别采用腘淋巴结免疫法和皮下免疫法免疫兔子,制备抗血清;间接ELISA法检测抗血清的效价;并应用分级饱和硫酸铵盐析法进行纯化。结果表明:获得抗BLyS多克隆抗体,间接ELISA法检测抗血清的效价为50万倍;获得抗BSA多克隆抗体,间接ELISA法检测抗血清的效价为5万倍。提示:分别成功制备了抗BLyS和抗BSA多克隆抗体,为进一步研究抗BLyS和重症肌无力动物模型之间的相关性奠定了基础。 3 抗BLyS抗体对EAMG的预防和治疗作用研究 建立实验性自身免疫性重症肌无力动物预防组、预防对照组、治疗组和治疗对照组,比较四组小鼠的临床症状、抗体滴度、游泳疲劳时间及肌电图变化。结果表明:预防组小鼠的临床症状评为0分,抗体滴度80%为阴性,游泳疲劳时间为阴性,肌电图衰减均为阴性,与正常组小鼠之间的差异不显著;治疗组临床症状评为1分,抗体滴度60%为阳性,40%为可疑阳性,游泳疲劳时间为阳性,肌电图衰减均为阳性,与正常组小鼠之间的差异显著;预防对照组和治疗
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