雌、孕激素对绒癌细胞系Galectin-3的调节作用

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目的:妊娠和滋养细胞疾病中,子宫内膜细胞和滋养细胞Galectin-3蛋白表达异常,但该蛋白在妊娠和滋养细胞疾病中的具体作用以及调控机制不明。本文旨在通过体外试验研究不同浓度雌、孕激素对BeWo绒癌细胞系中Galectin-3蛋白的表达,探讨雌、孕激素对滋养细胞侵袭性相关基因表达的影响作用。材料与方法:1.细胞来源人绒毛膜癌细胞株BeWo常规培养于含10%的小牛血清F12培养液中,在370C、5%CO2条件下培养。实验用细胞处于指数生长期。2.研究方法1)免疫荧光对galectin-3在人绒毛膜癌细胞株BeWo的定位和半定量检测。2) Western blot分析不同浓度雌、孕激素处理的BeWo细胞株上的galectin-3蛋白含量。3) RT-PCR测定不同浓度雌、孕激素处理的BeWo细胞株上的galectin-3 mRNA含量。3.统计方法:实验数据以均值±标准差( x±s)表示,采用SPSS软件进行统计学分析,两组间数据比较采用t检验,多组间数据比较采用方差分析以及q检测。P<0.05表示差异有显著性。结果:1.galectin-3在人绒毛膜癌细胞株BeWo有表达,蛋白主要定位于细胞浆中,细胞核有少量表达。10-8mol/ L浓度雌激素处理的和10-7、10-6 mol/ L浓度孕激素处理的BeWo细胞显色明显高于对照组(P<0.05),10-5mol/ L孕激素使Galectin-3表达降低(P<0.05),其余处理组无明显差异。2.Western blot结果显示10-8mol/ L浓度雌激素处理的和10-7、10-6 mol/ L浓度孕激素处理的BeWo细胞galectin-3蛋白含量均高于对照组(P<0.05),10-5mol/ L孕激素使Galectin-3表达降低(P<0.05),其余处理组无明显差异。3.RT-PCR结果显示10-8mol/ L浓度雌激素处理的和10-7、10-6 mol/ L浓度孕激素处理的BeWo细胞galectin-3mRNA含量均高于对照组(P<0.05),10-5mol/ L孕激素使Galectin-3表达降低(P<0.05),其余处理组无明显差异。结论:1. galectin-3在女性妊娠和滋养细胞疾病过程中起到了重要作用。2. 10-7mol/ L浓度雌激素可以上调滋养细胞中galectin-3蛋白的表达。3. 10-7、10-6 mol/ L浓度孕激素可以增加滋养细胞中galectin-3蛋白的表达,而10-5mol/ L浓度孕激素可以使滋养细胞中galectin-3蛋白的表达降低。4.雌、孕激素共同调节galectin-3蛋白的表达,使之保持滋养细胞内浓度的动态平衡。
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