【摘 要】
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两栖动物之所以能适应其复杂多样的生活环境,完全归结于长期的生物进化,导致它们外形和生理发生改变。两栖类动物的皮肤一般为裸露、湿润,因此为细菌的滋生提供了天然的温床。为了应对这些外来的细菌,两栖动物的皮肤会分泌黏液,其中包含多种结构特殊,功能复杂的活性物质。近年来研究发现,在两栖动物整个生命进程中,这些活性物质起着诸多调控作用。为了研究重庆地区产中华蟾蜍（Bufo gargarizans）、黑斑蛙（
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两栖动物之所以能适应其复杂多样的生活环境,完全归结于长期的生物进化,导致它们外形和生理发生改变。两栖类动物的皮肤一般为裸露、湿润,因此为细菌的滋生提供了天然的温床。为了应对这些外来的细菌,两栖动物的皮肤会分泌黏液,其中包含多种结构特殊,功能复杂的活性物质。近年来研究发现,在两栖动物整个生命进程中,这些活性物质起着诸多调控作用。为了研究重庆地区产中华蟾蜍（Bufo gargarizans）、黑斑蛙（Rana nigromaculatta Hallowel）和沼水蛙（Hylarana guentheri）的皮肤提取物的生物活性及其理化性质,我们对三种蛙进行了四种方式处理收集（乙醚法、电击法、肾上腺素法、剥皮法）,旨在考察不同条件下其提取物有何生物学活性且有何差异,揭示其生理生化适应机制,并对其应用寻求一定理论依据。主要结果：1、对三种蛙采用四种方法所得的粗提物进行了镇痛活性、抑菌活性、血液凝聚活性的测定,发现中华蟾蜍四种方法粗提物无镇痛和血液凝集活性,有抗菌活性；发现黑斑蛙四种方法粗提物无镇痛、血液凝集和抗菌活性；发现沼水蛙四种粗提物具有镇痛、抑菌、血液凝集活性,且效果较为显著。2、对沼水蛙的四种方法粗提物分别进行高效液相色谱（HPCL）分离纯化后,结果为：剥皮组图谱和其他三种方法粗提物（乙醚法、电击法、肾上腺素法）相比差异巨大,而三种方法（乙醚法、电击法、肾上腺素法）显示：粗提物所含物质基本相同,仅含量上具有一定差异,分别对四种方法收集的每个峰进行镇痛、抑菌和血液凝集活性检测,发现乙醚组的活性较高,因此其活性峰再一次进行纯化。3、经HPLC再次纯化后得到单一峰A。采用Lowry法,测得A组分蛋白含量为290μg/ml；能凝集兔的红细胞,人的各种血型红细胞,兔红细胞的效价为1.13gg/ml；这种凝集活性能被甘露聚糖所抑制；0℃-60℃较为稳定,100℃处理20min后仍具有大部分活性,在pH4-9时活性稳定,最适合pH为8；金属离子（K+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Fe2+、Cu2+）对活性几乎无影响；盐酸胍和SDS对其影响较大,脲对其影响较小。
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