【摘 要】
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目的:研究莲藕提取物的抗氧化与抗疲劳作用,以期为莲藕提取物功效的开发利用提供理论依据。方法:1、以莲藕可食部为原料,采用超声波提取法得到莲藕提取物（LRE）,采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）法与高效液相色谱（HPLC）法对LRE成分进行定性定量分析。2、测定LRE的DPPH、羟自由基清除能力及总抗氧化力;选用C2C12细胞,以200 μmol/L H2O2诱导产生氧化损伤,检测
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目的:研究莲藕提取物的抗氧化与抗疲劳作用,以期为莲藕提取物功效的开发利用提供理论依据。方法:1、以莲藕可食部为原料,采用超声波提取法得到莲藕提取物（LRE）,采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）法与高效液相色谱（HPLC）法对LRE成分进行定性定量分析。2、测定LRE的DPPH、羟自由基清除能力及总抗氧化力;选用C2C12细胞,以200 μmol/L H2O2诱导产生氧化损伤,检测细胞活力以及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）的活性和丙二醛（MDA）的含量,评价LRE的体外抗氧化作用。3、建立小鼠疲劳模型,采用小鼠力竭游泳试验进行抗疲劳效果的初步评价;LRE[2000mg/（kg·bw）]灌胃24天,试验结束时采取外周血、肝脏与肌肉组织,检测能量代谢与抗氧化相关生化指标。4、采用ELISA、q-PCR、免疫荧光等技术,探究肌肉中相关基因mRNA和蛋白水平的表达变化。结果:1、通过提取获得LRE,从LRE中鉴定出了 5类物质,包括类黄酮、酚酸、生物碱、鞣质和香豆素类物质,共计151种化合物。2、LRE具有较强的羟自由基、DPPH自由基清除能力和总抗氧化力;LRE干预后能明显改善H2O2导致的C2C12细胞活力下降,并且提高抗氧化酶SOD、GSH-Px、CAT活性,减少脂质过氧化产物MDA的产生。3、LRE可以显著延长小鼠力竭游泳时间,升高游泳后小鼠血糖与游离脂肪酸（NEFA）水平,降低血清乳酸（LA）、尿素氮（BUN）、乳酸脱氢酶（LDH）水平,升高肌肉与肝脏糖原水平,增强组织中AIP酶、糖原合酶（GCS）与琥珀酸脱氢酶（SDH）活性,提高血清和组织中抗氧化酶活性以及减少MDA的产生。4、LRE可以上调肌肉中Akt、AS160、GLUT4、PI3K基因mRNA和蛋白表达水平,下调JNK、p38MAPK基因mRNA和蛋白表达水平,发挥抗疲劳作用。结论:1、LRE含有多种活性物质,类黄酮与酚酸最为丰富,有望获得开发利用的新途径。2、LRE在体外具有较强的抗氧化能力,对H2O2诱导的C2C12细胞有明显的保护作用。3、LRE通过增加糖原的储备、减少LA和BUN的产生、提高NEFA水平以及增强能量代谢酶的活性,增强小鼠运动耐力;此外,LRE还能提高抗氧化酶活性,减少脂质过氧化产物的产生,降低氧化损伤,发挥抗疲劳作用。4、LRE通过调节肌肉中相关基因mRNA和蛋白水平的表达,改善能量代谢与抗氧化功能,发挥抗疲劳作用。
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