新型生物电化学传感器的制备

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众所周知,蛋白质在活的生物体内的相互作用在许多生命过程中起着重要的作用,为此,蛋白质间的电子传递吸引了很多研究者的兴趣,一些人工模拟的信号链构筑了类似的生物传感器来研究蛋白质间的电子传递。另一方面,蛋白质的检测是当今蛋白质组学研究的重点。本论文基于混合蛋白质膜修饰电极研究了蛋白质间的信息传递,并基于核酸适体修饰电极制备了检测凝血酶的电化学传感器。具体工作分为以下四个方面:1、第一部分利用核酸适体/聚乙烯基二茂铁修饰电极制备新型凝血酶传感器。并研究了支持电解质、沉积时间、缓冲液pH对该修饰电极检测凝血酶的影响。该传感器不需对核酸适体进行标记且聚合膜稳定,具有灵敏度高,响应信号强,操作简单等优点。2、第二部分研究了以核酸适体-金纳米粒子修饰电极制备的电化学凝血酶传感器。并研究了电极活化时间,凝血酶培养时间、培养温度、培养液对该修饰电极的影响。实验中,通过金纳米粒子的还原信号来检测凝血酶。该凝血酶传感器操作简单,快速,响应信号强,并能特异性地检测凝血酶。该传感器的进一步发展有望在实际生活中的疾病诊断和治疗中得到普遍应用。3、第三部分研究了辣根过氧化物酶(HRP)和细胞色素c (Cyt.c)混合蛋白质膜修饰电极的电子传输。虽然不能确定这两种蛋白质在生物体内是否存在合作,但我们可以通过这种研究,来类推蛋白质间的电子传输。实验结果显示:混合蛋白质修饰电极的电子传输速率常数比单一蛋白质修饰电极的电子传输速率常数要大,这表明混合蛋白质膜加强了蛋白质和电极间的电子传输。该双酶修饰电极对过氧化氢和氧气都有很好的催化响应。4、第四部分以层层组装的方法制备GOD-Cyt.c混合蛋白质修饰电极并对其进行了动力学研究。结果表明:混合蛋白质膜修饰电极可以极大地促进电极表面的葡萄糖氧化酶和溶液间的电子传输,在此细胞色素c既为葡萄糖氧化酶提供了良好的生物微环境,也为电极与溶液间的电子传输提供良好的电子传输通道。
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