类几丁质酶YKL-40及Toll样受体4在慢性鼻—鼻窦炎患者鼻窦黏膜中表达差异及其临床意义

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目的比较类几丁质酶YKL-40及Toll样受体4(TLR4)在慢性鼻-鼻窦炎(Chronic Rhinosinusitis, CRS)伴鼻息肉(Chronic Rhinosinusitis with Nasal Polyps, CRSwNP)与不伴鼻息肉(Chronic Rhinosinusitis without Nasal Polyps, CRSsNP)患者鼻窦黏膜中表达的差异及其临床意义。方法标本取自山东大学齐鲁医院耳鼻咽喉科自2013年8月至2014年4月住院手术的慢性鼻-鼻窦炎患者。术前根据患者的临床症状、体征、鼻内镜检查及鼻窦CT影像学资料进行诊断。依据我国2012年昆明CRS诊断标准,选取39例CRS患者作为试验组,其中CRSwNP 22例(男13例,女9例;年龄28~68岁),CRSsNP17例(男11例,女6例;年龄25-51岁)。CRSsNP组的组织标本取自患者窦口鼻道复合体黏膜,CRSwNP组患者取自初发鼻息肉且均为双侧多发性息肉病变患者的窦口鼻道复合体黏膜。所有患者术前1个月内未使用抗生素、糖皮质激素治疗。选取18例鼻中隔偏曲患者作为对照组,其中男15例,女3例,年龄17-78岁,且均经鼻窦CT排除鼻-鼻窦炎,组织标本取自下鼻甲黏膜。排除标准:①有免疫缺陷病史或糖尿病史;②有支气管扩张病史;③有肺囊性纤维化病史;④有肿瘤病史;⑤有高血压及冠心病病史;⑥有高脂血症。各组患者年龄(F=2.49,P>0.05)及性别构成(x2=2.84,P>0.05)差异无统计学意义。所有患者均被告知相关研究信息,并签署知情同意书。采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组中YKL-40、 TLR4及核因子KB(NF-κB) mRNA的表达;免疫组织化学染色检测YKL-40和TLR4蛋白在组织中的表达强度及分布。采用SPSS 17.0统计软件进行分析,三组间比较采用方差分析,两组间检验采用t检验;等级资料比较采用非参数检验(Kruskal-Walls检验、Mann-WhitneyU检验),相关分析采用Spearman等级相关。结果mRNA水平:YKL-40在CRSwNP组中的表达(0.91±0.17)高于对照组(0.49±0.09),差异有统计学意义(t=2.12 P<0.05); TLR4与NF-κB在CRSsNP组(0.88±0.19,0.69±0.13)和CRSwNP组(0.67±0.13,0.72±0.14)中的表达均低于对照组(1.48±0.14,1.20±0.15),差异有统计学意义(t值分别为-4.11、-2.48,2.33、2.27,P值均<0.05)。蛋白质水平:YKL-40在CRSwNP组中的表达高于CRSsNP和对照组(U值分别为72.5、73,P值均<0.01);TLR4在CRSwNP与CRSsNP组中的表达低于对照组(U值分别为62、38,P值均<0.01)。在CRSwNP组中,YKL-40与TLR4呈负相关(rmRNA=-0.741,P<0.01;r蛋白质=-0.46,P<0.05)。结论在CRSwNP中存在YKL-40高表达及TLR4、NF-κB低表达,并且YKL-40与TLR4呈负相关关系,提示二者可能存在交互作用,同时参与了CRSwNP的发生发展。
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