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本研究从自然发病的温州蜜柑(Citrus.unshiu Marc cv.)果实上分离柑橘黑腐病原菌,结合形态学与rDNA-ITS序列分析确定该病原菌为柑橘链格孢(Alternariacitri),并对其生物学特性、田间侵染规律及拮抗酵母菌进行了初步研究,得到了三株对柑橘采后黑腐病有很好防治效果的酵母菌株Wf-b-1,γ-60-11和Wm-9,主要研究结果如下:1.确定分离到的病原菌为柑橘黑腐病原菌:经过形态学、果实致病性检测及rDNA-ITS序列分析三方面研究,确认该病原菌为柑橘链格孢(Alternaria citri)。2.对柑橘黑腐病原菌的生物学特性研究:Alternaria citri在PDA培养基菌丝生长最为旺盛,而在柑橘叶培养基上产孢量最大,可达3.13×10~6 spores/mL;pH值对Alternaria citri的菌丝生长及产孢量没有明显影响。在以察氏为基础培养基的不同碳源、氮源对Alternaria citri的生长测试中,葡萄糖是菌丝生长最好的碳源,壳聚糖上产孢量最高,达1.80×10~6 spores/mL;牛肉膏是菌丝生长和产孢量最好的氮源。Alternaria citri适宜的生长温度为25℃～32℃,最适温度为30℃,最佳产孢温度为32℃。光照条件对Alternaria citri菌丝生长没有显著影响,但黑暗条件更利于产孢。Alternaria citri的致死温度为55℃左右。药剂敏感性测试实验显示,在测试的几种常用化学药剂中,以1000 mg/kg 25%咪鲜胺、1000 mg/kg 50%多菌灵和2,4-D+250mg/kg 70%纯品甲托对Alternaria citri的抑制效果最好。3.初步确定柑橘链格孢侵染途径:从花期至果实采收的各个时期,链格孢菌均可侵入果实而潜伏。在盛花期,发现花瓣、花萼、柱头和子房均带有黑腐病菌,尤其是花瓣上带菌率为100%;在果实发育期,蒂部果皮和脐部果皮带菌率最高,果实内部也侵入了少量的病菌,说明蒂部和脐部可能是病菌侵入的两种途径。4.筛选出能有效防治Alternaria citri的酵母菌三株:在in vitro初筛和复筛得到对Alternaria citri有拮抗作用的酵母菌12株。进一步通过in vivo筛选,得到能有效抑制Alternaria citri的拮抗酵母菌株Wf-b-1、γ-60-11和Wm-9。5.测定不同浓度拮抗酵母菌对Alternaria citri的抑制效果:在一定浓度范围内,拮抗酵母菌株Wf-b-1、γ-60-11和Wm-9的抑菌效果均与悬浮液的浓度成正相关。在Alternaria citri浓度为1×10~5 spores/mL,拮抗酵母菌浓度为1×10~8 CFU/mL时,培养8d后,Wf-b-1,γ-60-11和Wm-9控制果实发病率分别为16.49%,20.74%和25.44%。抑制率分别为55.57%,56.65%和50.48%。6.鉴定拮抗酵母菌:经形态、生理生化指标及rDNA-ITS序列分析对Wf-b-1和Wm-9进行了鉴定。结果表明:Wf-b-1为有孢圆酵母属(Torulaspora)球有孢圆酵母(Torulaspora globosa),Wm-9为汉逊酵母属(Hansenula)葡萄有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)。另外,γ-60-11来自于柠檬形克勒克酵母(Kloeckeraapiculata)34-9的诱变菌株。