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目的:探讨生长抑素类似物奥曲肽(octreotide,OCT)对人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP裸鼠移植瘤增殖的影响,观察生长抑素类似物奥曲肽对SKOV3/DDP移植瘤细胞SSTR-2及EGFR的表达的影响,探讨奥曲肽对人卵巢癌耐顺铂细胞株SK0V3/DDP移植瘤细胞的作用机制。
方法:1.配制SKOV3/DDP细胞株的单细胞悬液(5×107个/ml),接种于20只雌性BALB/c-nu/nu裸鼠右腋前皮下,构建SKOV3/DDP移植瘤动物模型。2.建模2周后,将成瘤的裸鼠随机分成4组:①对照组给予生理盐水50ml/kg,1次/d,皮下注射,连用28天;②顺铂组给予顺铂4mg/kg,成瘤后第1、8、15、22日腹腔注射;③奥曲肽组给予奥曲肽100μg/kg,1次/d,皮下注射,连用28天;④联合用药组给予奥曲肽100μg/kg,1次/d,皮下注射,连用28天,顺铂4mg/kg,成瘤后第1、8、15、22日腹腔注射。3.用药4周后以颈椎脱位法处死裸鼠,剥取移植瘤标本计算瘤湿重和瘤体积,并采用免疫组织化学法(SP法)检测SKOV3/DDP移植瘤SSTR-2和EGFR的表达,应用Image-Proplus6.0免疫组化图像分析系统分析SSTR-2和EGFR的表达量。
结果:1.20只实验裸鼠均建模成功,右腋窝下SKOV3/DDP移植瘤生长良好,局部无破溃等皮肤损害。顺铂组、奥曲肽组、联合用药组瘤湿重、瘤体积均低于对照组(p<0.001),差异有统计学意义;联合用药组的瘤湿重、瘤体积低于其他各治疗组(p<0.001),差异有统计学意义;2.顺铂组平均抑瘤率24.62%,奥曲肽组平均抑瘤率52.25%,联合用药组平均抑瘤率82.24%,各用药组组间比较,p<0.01,差异有统计学意义。3.SKOV3/DDP移植瘤标本的免疫组化实验结果显示,各组移植瘤细胞均有SSTR-2表达,顺铂组,奥曲肽组,联合用药组与对照组比较,p值分别为0.10,0.23,0.99,p>0.05,表达差异无统计学意义;4.对照组SKOV3/DDP移植瘤EGFR表达量显著高于各用药组,对照组与顺铂组,奥曲肽组,联合用药组比较,p值分别为1.0×10-3,1.05×10-6,1.64×10-9,p<0.01,差异均有统计学意义;联合用药组与奥曲肽组比较p=3.11×10-4,p<0.001,差异有统计学意义。
结论:1、应用单细胞悬液皮下注射法,可成功建立SKOV3/DDP裸鼠移植瘤模型,方法简便,有实用性。2、生长抑素类似物奥曲肽可有效抑制耐顺铂的SKOV3/DDP细胞株增殖,抑瘤效能优于顺铂。3、奥曲肽与顺铂联合应用对耐顺铂卵巢癌细胞抑制作用增强,作用优于单独用药,提示奥曲肽可能具有作为顺铂耐药调节剂的研发前景。4、奥曲肽抑制卵巢癌肿瘤细胞的机制与其抑制EGFR表达可能相关。5、本实验未能证实奥曲肽抑瘤作用与其受体SSTR-2的相关性。SSTRs在生长抑素类似物抗肿瘤作用机制中的地位需待深入研究。