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人Angiopoietin-2在中国出血性脑卒中人群中的功能研究—噬菌体抗体的构建和单核苷酸多态分析 脑卒中是中国首位致残和次位致死病因，分出血性和缺血性两类。出血性脑卒中约占中国人群发病的21％～48％，是高加索人群的2～3倍。这种种族发病率的差异，提示疾病发生机理可能不同。出血性脑卒中发病机理未明，高血压、动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)、血管先天发育异常、中毒、感染等均直接或间接促进了此病的发生和发展，而动脉粥样硬化和血管壁功能不全是脑卒中发病的基础。“损伤反应学说”提示，各种危险因素诱发的内皮功能失调，是动脉粥样硬化内膜损伤的基础。因此，血管内皮功能失调的研究，将有助于最终阐明AS发生的机制。Angiopoietin-2(Ang2)是最新克隆的一类血管内皮细胞特异的酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinase，RTK)配体Angiopoietin(Ang)中，唯一具有拮抗作用的生长因子，能竞争性地阻断angiopoietin-1(Ang1)与Tie2的结合而使血管内皮细胞处于不稳定状态。在VEGF的协调作用下，Ang2促进原始血管网络进入重塑过程，最终形成功能完善的血管。Ang2基因敲除的动物模型，早期血管发生不受影响，但进入成熟期后，由于失去Ang2的整合稳定作用，血管壁完整性遭到破坏，通透性增加，表现为水肿、出血而死亡。在自发性高血压性脑卒中易患大鼠(stroke-prone spontaneously hypertensive rat，SHRSP)和大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型中，均可见Ang2表达明显升高，出现水肿、出血和血管新生等病理变化。上述试验证据表明，Ang2在维持血管稳定性方面具有重要作用，Ang2功能异常引起的血管壁功能不全，可能是出血性脑卒中发病机理之一。 抗血管生长因子的单克隆抗体，在血管增生性疾病的诊断治疗方面具有广泛的应用价值。鉴于Ang2在血管发生中的重要作用，我们采用噬菌体展示技术，构建了鼠抗人Ang2单链抗体(single chain Fv against human Ang2，scFv-Ang2)，以期用作载体，研究Ang2在出血性脑卒中的作用；或者作为中和抗体或药物载体，阻断Ang2自身或者与之相互作用的其他因子介导的血管新生，从而为血管