研究目的:本研究通过建立C2C12肌管细胞模型并转染miRNA-1模拟物或抑制剂以上调或下调miRNA-1的表达,从而探究miRNA-1对肌管细胞衰老的影响及其与其他肌肉特异性miRNA表达的关系,以期为阐明运动抗骨骼肌衰老提供理论依据。研究方法:本实验体外培养小鼠成肌细胞(C2C12细胞),并将其诱导分化为肌管细胞,同时人工设计茎环状miRNA-1模拟物、miRNA-1抑制剂和阴性对照物,并将其转染至肌管内以干预miRNA-1的表达。实验分组:空白对照组(C组)、miRNA-1模拟物组(M组)、miRNA-1抑制剂组(I组)和阴性对照组(N组)。本实验使用β-半乳糖苷酶染色检测C2C12肌管细胞衰老阳性率以探究干预对细胞衰老的影响,同时采用实时荧光定量PCR法测定肌管细胞中肌肉特异性 miRNA(miRNA-1、miRNA-133a、miRNA-133b、miRNA-181a、miRNA-206、miRNA-486、miRNA-499)的相对表达量。实验结果:1)与C组相比,细胞衰老阳性率在N组中无显著性差异,在M组中增加极为显著(P<0.01),而在Ⅰ组中降低极为显著(P<0.01)。2)与C组相比,M组miRNA-1表达显著上调(P<0.05),且Ⅰ组miRNA-1表达显著下调(P<0.05)。M组和Ⅰ组中miRNA-133a和miRNA-1 33b的表达均无显著差异。M 组 miRNA-181a 下调显著(P<0.05),miRNA-206、miRNA-486 下调极为显著(P<0.01),miRNA-499相对表达量增加极为显著(P<0.01),同时,Ⅰ组miRNA-181a、miRNA-206、miRNA-486 上调极为显著(P<0.01),miRNA-499 相对表达量显著减小(P<0.05)。结论:1)本实验人工设计的茎环状miRNA-1模拟物和抑制剂能够有效上调或下调肌管细胞miRNA-1的表达。2)在肌管细胞中,miRNA-1上调可以促进细胞衰老;而miRNA-1下调则抑制细胞衰老。3)miRNA-1的变化使肌管细胞内 miRNA-181a、miRNA-206、miRNA-486 发生反向变化,而 miRNA-499 同步变化。但对miRNA-133a、miRNA-133b均无明显影响。