可口革囊星虫多肽对小鼠学习记忆能力的影响

来源 :宁波大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yoyoyu2008
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本研究优化盐法和酸法提取可口革囊星虫胶原蛋白,对比传统水煮工艺所得可口革囊星虫胶原蛋白分子量分布,得出传统水煮工艺所得可口革囊星虫胶原蛋白分子量分布广,但无特异性蛋白条带。同时采用谷氨酰胺转氨酶对可口革囊星虫糜进行处理,经过处理的样品水煮后弹性及黏性均有所改善。由氨基酸分析结果可知,可口革囊星虫虫体必需氨基酸含量高,同时与鲜味有关的谷氨酸含量最高,因此由可口革囊星虫加工而成的土笋冻味道鲜美且营养丰富。采用响应面法优化可口革囊星虫抗氧化肽制备工艺,通过酶筛选试验确定最佳用酶为木瓜蛋白酶。在单因素试验基础上确定酶解时间、加酶量和料液比为自变量,以总抗氧化能力(T-AOC)为响应值,通过响应面法分析得出最优条件为酶解时间为4.28h,加酶量为3614U/g,料液比为1:36,参考实际因素,将提取条件调整为酶解时间4.25h,加酶量3600U/g,料液比1:36,该条件下实际测得可口革囊星虫胶原抗氧化肽的T-AOC为3.8U/mg,同时测定该条件下清除DPPH自由基能力为78.25%。采用硫酸亚铁螯合可口革囊星虫多肽,考察星虫多肽浓度,反应液pH值,多肽-亚铁质量比对星虫多肽亚铁螯合物螯合率的影响,单因素试验初步确定最佳螯合条件为星虫多肽浓度3%,反应液pH值5,多肽-亚铁质量比3:1,该条件下星虫多肽亚铁螯合物螯合率为87.98%±0.78%,同时测定该条件下A-TOC值为66.12U/mg。以灌胃方式给予四组小鼠以不同剂量可口革囊星虫多肽的补充,灌胃时间持续15天,之后采用Morris水迷宫对试验小鼠进行空间学习记忆能力检测。结果发现灌胃可口革囊星虫多肽的小鼠,水迷宫训练期间潜伏期比对照组短,探索期间围绕平台所在象限的时间和穿过平台次数均高于对照组。此外,各试验组小鼠的体重、视觉能力和运动能力都无太大差异,说明可口革囊星虫多肽对空间学习记忆能力的作用是特异的,而不是因为体重的增加、视觉能力的变化或者运动能力的变化所引起的。水迷宫试验之后,我们利用实时荧光定量PCR检测各组试验小鼠海马体和学习记忆相关的基因(NR2A、NR2B、BDNF和CREB)的mRNA表达量的变化,结果表明可口革囊星虫多肽能够提高NR2A、NR2B、BDNF和CREB的mRNA表达量,这解释了经过可口革囊星虫多肽灌胃的小鼠学习记忆能力提高的原因。
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