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背景及目的食管癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，在我国食管癌的死亡率居恶性肿瘤的第四位，而食管癌的浸润转移又是引起食管癌患者死亡的主要原因，因此对食管癌发生、浸润转移机制的探讨己成为研究的热点之一。核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB，NF-κB)，是一类重要的核转录因子，主要形式为p50和p65组成的二聚体，p50是与DNA结合的部位，p65参与基因转录的起始调节，并可促进p50与DNA结合。它可调控多种基因的表达，与肿瘤的发生、发展、浸润及转移均有着密切的关系。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMPs)是一个含锌离子的肽链内切酶家族，可降解细胞外基质，从而参与恶性肿瘤的浸润、转移，MMP-9属于其中的明胶酶类。细胞间粘附分子-1(Intercellular adhesion molecule 1，ICAM-1)是一种非常重要的细胞粘附分子，它可以调节细胞与细胞、细胞与细胞外基质间的相互结合，被认为在肿瘤的局部浸润和远处转移中起着重要的作用。研究表明，乳腺癌、胃癌、肺癌等多种肿瘤组织中NF-κB激活后可上调MMP-9和ICAM-1蛋白的表达，促进恶性肿瘤的浸润转移。但在食管鳞癌组织中关于NF-κB p50、p65和MMP-9、ICAM-1关系的研究，目前国内外尚未见报道。本研究采用免疫组化SP法及原位杂交技术联合检测NF-κB p50、p65蛋白及mRNA在食管鳞癌及癌旁粘膜组织(原位癌、不典型增生组织及正常食管粘膜上皮)中的表达，从蛋白及mRNA水平观察NF-κB与食管鳞癌发生、发展的关系；以免疫组化SP法检测MMP-9、ICAM-1蛋白在食管鳞癌组织及癌旁粘膜组织中的表达，并探讨NF-κB p50、p65、MMP-9、ICAM-1在食管鳞癌发生及浸润转移中的作用及其相互关系。材料和方法49例食管癌手术切除标本取自郑州大学第一附属医院，所有病例术前均无化疗、放疗及免疫治疗史。病理组织学证实49例食管癌均为鳞状细胞癌，其中Ⅰ级24例，Ⅱ级16例，Ⅲ级9例；淋巴结转移组23例，手术清扫的食管周围淋巴结中发现癌转移；无淋巴结转移组26例，食管周围淋巴结中未发现癌转移。浸润深度分两组，浅层组13例，肿瘤浸润深度在粘膜层、粘膜下层或浅肌层；深层组36例，肿瘤浸润深度在深肌层或外膜层。每例标本均在癌灶及癌旁粘膜组织处分别取材。应用免疫组化SP法及原位杂交技术检测NF-κB p50、p65在食管鳞癌及癌旁粘膜组织中的表达，从蛋白及mRNA水平观察NF-κB p50、p65与食管鳞癌发生发展的关系；以免疫组化SP法检测了MMP-9、ICAM-1蛋白在食管鳞癌及癌旁粘膜组织中的表达。利用SPSS10.0统计软件处理数据，两样本率的比较采用四格表资料χ~2检验；多样本率的比较采用行列表资料的χ~2检验；相关性检验用Spearman相关分析。以α=0.05为显著性检验水准。结果1．NF-κB p50蛋白的阳性表达率在癌旁正常粘膜上皮、不典型增生组织、原位癌及浸润癌组织中分别是28.1％，36.8％，33.3％，55.1％，浸润癌与癌旁正常粘膜上皮相比，差异有统计学意义(P<0.05)。NF-κB p65蛋白的阳性表达率在癌旁正常粘膜上皮、不典型增生组织、原位癌以及浸润癌中分别为18.8％，42.1％，50.0％，57.1％，浸润癌与癌旁正常粘膜上皮相比，差异有统计学意义(P<0.05)。2．NF-κB p50蛋白的表达与食管鳞癌分化程度、浸润深度有关(P<0.05)，但与淋巴结转移无关(P>0.05)(Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级食管鳞癌组织中分别为37.5％，62.5％，88.9％；深层浸润组为69.4％，浅层浸润组为15.4％；淋巴结转移组为60.9％，无淋巴结转移组为50.0％)。NF-κB p65蛋白的表达与食管鳞癌浸润深度和淋巴结转移均有关(P<0.05)，而与分化程度无关(P>0.05)(深层浸润组为75.0％，浅层浸润组为7.7％；淋巴结转移组为87.0％，无淋巴结转移组为30.8％；Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级食管鳞癌组织中分别为41.7％，68.8％，77.8％)。3．NF-κB p50 mRNA的阳性表达率在癌旁正常粘膜上皮、不典型增生组织、原位癌及浸润癌中分别为21.9％，31.6％，41.7％，53.1％，浸润癌与癌旁正常粘膜上皮相比，差异有统计学意义(P<0.05)。NF-κB p65 mRNA的阳性表达率在癌旁正常粘膜上皮、不典型增生组织、原位癌及浸润癌中分别是18.8％，36.8％，33.3％，55.1％，浸润癌与癌旁正常粘膜上皮相比，差异也具有统计学意义(P<0.05)。4．NF-κB p50 mRNA的表达与食管鳞癌的浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05)(深层浸润组为66.7％，浅层浸润组为15.4％；淋巴结转移组为78.3％，无淋巴结转移组为30.8％)，与分化程度无关(P>0.05)(Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级食管鳞癌组织中分别为37.5％，62.5％，77.8％)。NF-κB p65 mRNA的表达也与食管的鳞癌浸润深度和淋巴结转移有关(P<0.05)(深层浸润组为69.4％，浅层浸润组为15.4％；淋巴结转移组为73.9％，无淋巴结转移组为38.5％)，而与分化程度无关(P>0.05)(Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级食管鳞癌组织中分别为45.8％，50.0％，88.9％)。5．MMP-9蛋白在癌旁正常粘膜上皮、不典型增生组织、原位癌及浸润癌组织中的阳性表达率呈逐渐升高趋势(其阳性率分别为34.4％，52.6％，58.3％，71.4％)，食管鳞癌组织中MMP-9蛋白的阳性表达率显著高于癌旁正常粘膜上皮(P<0.05)。ICAM-1蛋白在食管癌旁正常粘膜上皮、不典型增生组织及原位癌和浸润癌组织中的阳性表达率分别为0.0％，0.0％，0.0％，42.9％，浸润癌与癌旁粘膜组织相比，差异均有统计学意义(P<0.05)。6．MMP-9蛋白的表达与食管鳞癌浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05)，但与分化程度无关(P>0.05)(Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级食管鳞癌组织中分别为58.3％，75.0％，100.0％；深层浸润组为80.6％，浅层浸润组为46.2％；淋巴结转移组为95.7％，无淋巴结转移组50.0％)。ICAM-1蛋白的表达与食管鳞癌分化程度、浸润深度和淋巴结转移均有关(P<0.05)(Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级食管鳞癌组织中分别为16.7％，68.8％，66.7％；深层浸润组为52.8％，浅层浸润组为15.4％；淋巴结转移组为69.6％，无淋巴结转移组为19.2％)。7．NF-κB p50、p65 mRNA的表达均与相应蛋白的表达呈正相关性(P<0.05)。8．NF-κB p50和p65蛋白的表达和MMP-9及ICAM-1蛋白的表达之间均呈正相关关系(P<0.05)。结论1．食管鳞癌中NF-κB p50、p65蛋白及mRNA的阳性表达率均显著高于正常食管粘膜组织；从癌旁正常粘膜上皮、不典型增生组织、原位癌到浸润癌，NF-κB p50、p65蛋白及mRNA的阳性表达率呈逐渐增高趋势，提示其表达可能与食管鳞癌的发生有关。2．NF-κB p65蛋白及mRNA的表达均与食管鳞癌的浸润深度及淋巴结转移有关。提示NF-κB p65的活化可能对食管鳞癌的浸润转移有促进作用。3．MMP-9、ICAM-1蛋白的阳性表达与食管鳞癌的浸润深度及淋巴结转移有关，提示MMP-9、ICAM-1的蛋白表达水平可反映食管鳞癌浸润转移的潜能。4．NF-κB p50、p65蛋白表达与MMP-9及ICAM-1蛋白的表达均呈正相关。提示NF-κB p50、p65蛋白的活化可能通过调节MMP-9、ICAM-1蛋白的表达，从而促进了食管鳞癌的浸润和转移。