彩色棉色素相关基因GHLDOX基因功能研究及彩色棉再生体系建立

被引量 : 0次 | 上传用户:crazymouse
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:天然彩色棉又称有色棉,是棉纤维具有天然色彩的一类特殊棉花,属陆地棉(2n=52)。因彩色棉纤维具有天然色彩,无需人工染色,既节省生产成本又减少环境污染,近年来受到社会关注和科研单位的重视。但是目前天然彩色棉只有棕色和绿色两种,颜色单一,严重制约了天然彩色棉产业的发展。因此利用基因工程改良天然彩色棉纤维色泽具有重要意义。本实验选取天然彩色棉新彩棉5号和新彩棉7号为植物材料,(1)克隆了天然彩色棉无色花色素双加氧酶基因(GhLDOX)全长cDNA序列,并对其功能进行了初步研究;(2)通过体胚发生途径建立了新彩棉7号的再生体系,为利用农杆菌介导的遗传转化方法对天然彩色棉纤维色泽和品质奠定基础。方法:(1)通过RACE技术获得无色花色素双加氧酶基因(GhLDOX)的全长cDNA序列;(2)构建GhLDOX基因的植物过表达载体并通过叶盘法转化了烟草,并对转基因植物进行检测。(3)构建GhLDOX基因的原核表达载体,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,对该基因的表达产物进行了分析;(4)以新彩棉5号和7号为植物材料,以MSB培养基为基本培养基,通过调节培养基中激素及培养条件进行愈伤组织诱导和分化,获得了新彩棉7号再生植株。结果:(1)获得的无色花色素双加氧酶GhLDOX基因1323bp的全长cDNA序列,其ORF 1062bp,编码一个含354个氨基酸的多肽链。在NCBI网站同源比对分析发现其属类黄酮无色花色素双加氧酶类;(2)将pzp35S-GhLDOX植物过表达载体通过叶盘法转化烟草,并通过PCR检测获得了转基因烟草;(3)通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,对构建的pET28a+-GhLDOX载体的表达产物进行分析,在IPTG诱导4小时该基因开始表达蛋白质,6小时最高;(4)通过调节培养基中激素及培养条件,获得了新彩棉7号的再生植株,建立了新彩棉7号的再生体系。结论:(1)利用5’RACE技术克隆获得了彩色棉类黄酮无色花色素双加氧酶GhLDOX基因的全长cDNA序列;(2)GhLDOX基因编码的蛋白质在IPTG 20mg/ml诱导6小时时表达最高。(3)通过体胚发生途径,建立了彩色棉新彩7号的再生苗,为利用农杆菌介导的遗传转化方法对天然彩色棉纤维色泽改良奠定基础。
其他文献
刑事诉讼法律再修正的先决条件是诉讼理念的更新。我国《刑事诉讼法》再修正应当坚持以下基本理念:贯彻"适度超前,兼顾现实"的基本方针,把握好立法的前瞻性和现实性;实现"保
20世纪70年代以来,由于世界范围的节能要求,建筑物加强了密闭性,相应地影响了室内空气质量。另一方面,有机合成材料在室内装饰及设备用具方面的广泛应用,致使挥发性有机化合
随着深圳市综合配套改革方案的全面施行,沉寂许久的"行政三分制"改革终于浮出水面。作为一项创新的行政管理方式,"行政三分制"亟待理论上给出合理的回应。行政法学领域新近兴
<正>刚刚过去的这个冬天,在我国南方贵州、湖南、江西等广大地区遭受了百年未遇的冰雪灾害。在分析这一灾害的成因时,频频提到了拉尼娜现象。
探讨镀银纤维含量及其在织物中的分布对织物静电性能的影响。通过测试和分析不同镀银纤维含量和分布的平纹织物电荷面密度,结果表明:随着镀银纤维含量的增加电荷面密度减小,
目前各地都在建设环境行政执法与刑事司法衔接制度,行政执法与刑事司法部门协同的目的是了进一步整合环境行政执法力量与刑事司法力量,为有效打击环境违法犯罪行为。环境违法
聚丙烯具有密度小、生产成本低、硬度高、比重轻、拉伸强度好、能随意拉伸、透明性好、注塑性能好、耐化学性能好等优点,在化工、轻工、家用电器、电子、建材、汽车工业、装
应用物种丰富度和物种多样性指数及群落均匀度等指标对浙江省天台山常绿阔叶林次生演替序列物种多样性进行研究.结果表明:天台山次生森林从针叶林到针阔混交林到常绿阔叶林的
宋元之际出现了众多叛宋降元的将领,蜀中名将刘整是其中一员。刘整在元朝灭宋历程中发挥了重要的作用,但由于其降将身份,始终不被元朝统治者所信任,且与蒙古将领矛盾重重,终
教育心理学中占主导地位的方法蕴涵了如下预设:能对相关的“实验对象”进行精确的测量;实验操控和偏离变量的设置不会对实验结果造成消极影响;在教育心理学的试验中能够得到普遍