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目的穿孔素蛋白（perforin）是细胞毒性淋巴细胞发挥靶细胞杀伤作用中的重要蛋白,Perforin基因也是原发性HLH发病机制中最主要的突变基因之一。本研究探讨perforin在继发性噬血细胞性淋巴组织细胞增多症（Secondary hemophagocytic lymphohistiocytosis,sHLH）患者外周血细胞毒性淋巴细胞的表达情况、细胞毒性淋巴细胞亚群的比例及其临床意义。方法收集19例初诊sHLH患者外周血标本,以10例正常体检者为对照,并且有6例患者在临床缓解后采取外周血,以流式细胞术检测外周血各类细胞毒性淋巴细胞perforin分子的表达水平,并检测细胞毒性淋巴细胞亚群的比例。收集患者相关实验室检查结果并与细胞毒性淋巴细胞中perforin蛋白的表达水平,细胞毒性淋巴细胞比例进行相关性分析。结果（1）初诊sHLH组外周血NK细胞比例明显低于正常对照组（P=0.006）,而CD8+T细胞比例、CD56+T细胞比例两组间差异无统计学意义（P>0.05）。（2）初诊sHLH患者组的perforin分子在CD56+T细胞的阳性表达率明显高于正常对照组（P=0.035）,而perforin分子在CD8+T细胞、NK细胞的阳性表达率两组间差异无统计学意义（P>0.05）。（3）临床缓解sHLH患者组外周血CD8+T细胞比例明显低于初诊sHLH组（P=0.023）,而NK细胞比例、CD56+T细胞比例两组间差异无统计学意义（P>0.05）。（4）临床缓解sHLH患者组与初诊sHLH组perforin分子在各细胞毒性淋巴细胞的阳性表达率进行比较,差异无统计学意义（P>0.05）。（5）初诊sHLH患者CD56+T细胞比例与HB呈正相关（r=0.464,P=0.045）,与Age成负相关（r=-0.456,P=0.049）;NK细胞比例与FIB成正相关（r=0.531,P=0.023）。（6）初诊sHLH患者perforin蛋白在CD8+T细胞的表达水平与sCD25成正相关（r=0.498,P=0.035）;perforin蛋白在CD56+T细胞的表达水平与ALT成负相关（r=-0.516,P=0.028）。结论初诊sHLH患者NK细胞比例明显降低,而perforin蛋白在CD56+T细胞的阳性表达率则显著升高。在治疗达临床缓解后,临床缓解sHLH患者CD8+T细胞比例显著低于初诊时。因此,细胞毒性淋巴细胞比例及perforin蛋白在各类型细胞毒性淋巴细胞的表达的检测,在sHLH患者具有重要意义。提示sHLH发病过程中存在NK细胞比例的下降及CD56+T细胞perforin蛋白表达的增强,并且可能与sHLH发病机制中NK细胞活性缺失、免疫过度活化有关。而完全缓解后CD8+T细胞比例下降可能是患者获得临床疗效的机制之一。动态检测细胞毒性淋巴细胞比例及perforin蛋白表达情况有助于判断sHLH病情的变化。目的噬血细胞性淋巴组织细胞增生综合征（Hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH）是一类因各种因素导致体内单核巨噬细胞系统过度活化,细胞因子形成级联风暴从而导致多种组织器官损伤的疾病。多细胞因子风暴的产生是HLH至关重要的发病机制之一。目前发现的HLH发病机制中突变的基因中,大部分都涉及细胞毒性颗粒释放的过程。颗粒酶B（Granzyme B）是细胞毒颗粒的重要组成成分。本研究采用流式细胞因子微球列阵（Cytometric Bead Array,CBA）flex set技术检测sHLH患者血清中Granzyme B表达水平,同时检测sHLH患者血清细胞因子表达水平,并探讨sHLH患者血清Granzyme B表达水平与细胞因子表达水平、临床指标之间的相关关系,以及在sHLH患者中的预后价值。方法收集44例初诊sHLH患者外周血清标本,以15例正常体检者为对照,以CBA flex set技术检测血清Granzyme B表达水平,并同时检测血清IFN-γ、IL-1 β、IL-10、MIG、IP-10细胞因子表达水平。收集患者相关临床数据,并将血清Granzyme B的表达水平与细胞因子表达水平、临床数据进行相关性分析。并探讨血清Granzyme B的表达水平在sHLH患者中的预后价值。结果（1）初诊sHLH患者血清Granzyme B表达水平显著高于正常对照组（P=0.001）。（2）淋巴瘤相关HLH组（LHLH）血清的Granzyme B的表达水平较非淋巴瘤相关HLH组（Non-LHLH）显著升高（P=0.043）。（3）初诊sHLH患者血清Granzyme B表达水平与IFN-γ表达水平呈正相关（r=0.664,P<0.001）,与IL-10表达水平呈正相关（r=0.619,P<0.001）,与MIG表达水平呈正相关（r=0.657,P<0.001）,与IP-10表达水平呈正相关（r=0.614,P<0.001）,而与IL-1β表达水平未见明显相关关系（P>0.05）。（4）初诊sHLH患者血清Granzyme B表达水平与 LDH 呈正相关（r=0.523,P<0.001）,与 WBC 呈负相关（r=-0.327,P=0.037）,而与 HB、PLT、SF、ALT、AST、ALB、sCD25、CRP、TG、FIB、ESR 未发现明显相关关系（P>0.05）。（5）血清 Granzyme B 为 11.95pg/mL 为 cutoff值,分别分成Low Granzyme Bgroup（0pg/mL<Granzyme B≤11.95pg/mL）和High Granzyme B group（Granzyme B>11.95pg/mL）,High Granzyme B group 中位生存时间为26.5（14～83.25）天,而Low Granzyme B group中位生存时间为107（20～176.25）天,High Granzyme B group 生存时间低于 Low Granzyme B group,但OS分析两组生存曲线未见明显差异（P=0.187）。结论血清Granzyme B表达水平在sHLH患者明显升高,尤其在LHLH组高于Non-LHLH组,对于鉴别LHLH有重要作用。血清Granzyme B表达水平与细胞因子表达水平呈正相关,提示其在sHLH发病机制中的细胞因子风暴形成有一定作用。血清Granzyme B表达水平可能能够提示sHLH预后,血清Granzyme B>11.95pg/mL的患者可能预后更差。目的噬血细胞性淋巴组织细胞增生综合征（Hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH）是一组CD8+T淋巴细胞及单核-巨噬细胞系统过度增生并产生大量炎症细胞因子的临床综合征。已有研究证实miR-146a广泛参与炎症反应性强度的调节,而miR-30e与NK细胞细胞毒活性的调节有关。本研究采用实时定量PCR检测血清 miR-146a 和 miR-30e 在继发性 HLH（secondary HLH,sHLH）患者的表达情况,并探讨血清miR-146a和miR-30e在sHLH患者表达水平与临床指标之间的相关关系,在sHLH鉴别中的意义和sHLH患者预后中的价值,及其与细胞毒性淋巴细胞比例及Perforin表达的关系。方法收集35初诊sHLH患者外周血清标本,以10例正常体检者为对照,以定量PCR检测血清miR-146a和miR-30e的表达水平,收集患者临床相关数据,并将血清miR-146a和miR-30e的表达水平与临床数据进行相关性分析,同时探讨血清miR-146a和miR-30e在sHLH鉴别中的意义和sHLH患者预后中的价值。结果（1）初诊sHLH患者血清中miR-146a的表达水平显著低于正常对照组(P<0.001=;初诊sHLH患者血清中miR-30e的表达水平显著低于正常对照组(P<0.001=。（2）淋巴瘤相关HLH组（LHLH）、感染相关HLH组（IHLH）、自身免疫相关HLH组（AHLH）三组sHLH患者之间的血清miR-146a和miR-30e表达水平进行两两比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。（3）血清miR-146a鉴别出sHLH患者和正常人的ROC曲线下面积为0.931,标准误为0.037,其95%可信区间为（0.859,1）,血清miR-146a可以有效地鉴别出sHLH患者和正常人;血清miR-30e鉴别出sHLH患者和正常人的ROC曲线下面积为0.914,标准误为0.042,其95%可信区间为（0.832,0.997）,血清miR-30e可以有效地鉴别出sHLH患者和正常人。（4）初诊sHLH患者血清miR-146a和miR-30e表达水平与 Age、WBC、HB、PLT、SF、ALB、ALT、AST、LDH、FIB、TG、ESR、sCD25、CRP进行相关性分析,均未发现明显相关关系（P>0.05）。（5）分别以表达水平的中位数为截点分为低表达组和高表达组,血清miR-146a低表达组和高表达组患者的OS无明显差异（P>0.05）;血清miR-30e低表达组和高表达组患者的OS无明显差异（P>0.05）。而以miR-30e与miR-146a表达水平比值中位数为截点,分为比值低组和比值高组。miR-30e/miR-146a比值低组sHLH患者OS显著长于比值高组（P=0.022）。（6）血清miR-146a低表达组的CD8+T细胞的比例显著低于血清miR-146a高表达组（P=0.016）,血清miR-146a表达水平与CD8+T细胞的比例呈正相关（r=0.734,P=0.007）;而血清miR-30e低、高表达组之间的细胞毒性淋巴细胞的比例均无统计学差异（P>0.05）,血清miR-30e表达水平与细胞毒性淋巴细胞的比例未见明显相关关系（P>0.05）。（7）血清miR-146a和miR-30e低、高表达组之间的Perforin蛋白在细胞毒性淋巴细胞的表达率均无统计学差异（P>0.05）,血清miR-146a和miR-30e表达水平与Perforin蛋白在细胞毒性淋巴细胞的表达率未见明显相关关系（P>0.05）。结论血清中miR-146a和miR-30e表达水平在sHLH患者显著降低,并且可以有效的鉴别出sHLH患者和正常人,表达水平越低的更有可能是sHLH患者。血清中miR-30e与miR-146a表达水平比值（miR-30e/miR-146a）能够提示sHLH患者预后,miR-30e/miR-146a比值低的sHLH患者预后可能较好。血清miR-146a表达水平与CD8+T细胞的比例呈正相关,miR-146a低表达组的CD8+T细胞的比例显著低于血清和miR-146a高表达组,因此miR-146a可能参与sHLH发病机制中的CD8+T细胞的缺失。