GB1e在乳腺癌细胞中的亚细胞分布及功能的初研究

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:reza777
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)为脊椎动物大脑中的主要抑制性神经递质,通过离子型受体GABAA和GABAC以及代谢型受体GABA_B发挥其功能。其中,代谢型GABA_B受体属于GPCR家族,通过G蛋白及其下游效应分子调节细胞功能。GABA_B受体在大脑中分布广泛,其功能异常与多种神经性及精神性疾病相关,包括癫痫、精神分裂症和药物滥用等。因此,GABA_B受体已经成为神经系统疾病中的一个关键靶点。研究发现,GABA_B受体可以调节多种肿瘤细胞的增殖与迁移,但机制不明。GABA_B受体的亚单位GB1具有多种亚型,其中GB1e(不含跨膜区及胞内区)的mRNA广泛表达于外周组织及多种人源肿瘤细胞系中。有一篇报道表明GB1e在人的正常的外周组织中是表达的,但是尚未见到肿瘤细胞中GB1e表达的报道。本论文检测了外源性GB1e在人乳腺癌细胞MDA-MB-231及MCF-7中的亚细胞分布。首先,构建了带有不同标签的GB1e质粒,包括pEGFP-N1-GB1e-GFP,pEGFP-N1-HA-GB1e和pEGFP-N1-GB1e-3×Flag等;其次,构建了稳定表达GB1e的人乳腺癌细胞系MDA-MB-231/HA-GB1e和MCF-7/HA-GB1e。 ELISA实验结果表明GB1e在MDA-MB-231和MCF-7细胞膜表面没有表达,confocal图像显示GB1e分布于细胞质中,免疫沉降法(IP)检测到GB1e可分泌到细胞培养液中,并且分泌性的GB1e可以通过吞噬作用重新进入细胞质。HA-GB1e稳定表达细胞系中,Baclofen能够增强Akt的磷酸化水平,但对细胞增殖没有影响。现有结果为后续研究GB1e在肿瘤细胞中的生物学功能奠定了实验基础。
其他文献
论文借助认知神经科学的眼动追踪技术,研究用户在不同的信息卷入度情境下如何关注社交媒体的信源、信息和系统生成线索,以及信源和信息的系统生成外围线索如何影响用户的社交
自主神经功能病变与心脏疾病的死亡风险升高密切相关~[1]。心率变异性(heart rate variability,HRV)是通过自主神经系统的交感神经和迷走神经成分反映心脏调节功能的重要指标~[
景观生态学是一门近年来迅速兴起的学科,亦是当今生态学研究的核心之一。景观生态学研究方法是促进景观生态学理论发展和保证景观生态学得到有效应用的手段和保障。本文简要
本文回顾CDA的产生和发展、理论渊源和主要观点及其受到的主要批评 ,重点阐释巴斯卡尔的批评实在论 ,讨论CDA如何从CR的角度解决认识的基础问题并且回答上述批评。 This art
我国建筑市场呈现快速发展趋势,利用供应链管理体制进行深化改革,体现了行业管理思维的先进性。随着建筑市场规范化发展,建筑供应链在行业建设中的功能更加广泛,将其用于材料
通过洛阳至栾川高速公路堂洼大桥钻孔灌注桩基础混凝土的耐久性研究分析,提出了提高桩基混凝土结构耐久性的途径。
几种蔬菜罐头的加工技术蔬菜罐头就是将新鲜蔬菜通过加工处理,罐装密封,达到长期保持蔬菜的色泽、风味和营养的目的。由于其具有制作简易,成本低廉,容易保存,口味特殊等特点而深受
本文以企业的战略目标和内部条件为基础,分析企业外部的机会和威胁,寻找影响企业战略目标、企业可以利用的机会和能规避的风险,然后基于已识别出的机会和风险来分辨企业内部
目的:探讨干眼的诊断与治疗方法。方法:回顾分析我院诊治的65例干眼患者的临床与诊治资料。结果:65例干眼患者根据临床表现及Schirmer试验、泪膜破裂时间、孟加拉红试验及角