【摘 要】
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DNA分子的压缩与解压缩对基本生命过程的探索以及生物技术和生物医学等方面的研究具有极其重要的意义。研究各种表面活性剂引起的DNA分子的压缩与解压缩有助于在体外了解DNA
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DNA分子的压缩与解压缩对基本生命过程的探索以及生物技术和生物医学等方面的研究具有极其重要的意义。研究各种表面活性剂引起的DNA分子的压缩与解压缩有助于在体外了解DNA的转录和复制等生物学过程,也有利于促进DNA的提取、纯化以及基因治疗等技术的发展。然而,由表面活性剂引起的DNA分子的压缩与解压缩的详细机理到目前为止还未完全解决,仍然是一个有挑战性的问题。本论文的主要工作简述为:(1)通过自组装技术制备了一种新型nanoPAA-Zn Cl2-AuLs固体基底,研究发现其表面拥有大面积有序的纳米级粗糙结构,如纳米间隙和纳米尖端;将罗丹明6G(R6G)作为探针分子对其SERS性能进行评估,结果表明,该基底上的最低浓度检测限低达10-11 M,其增强因子(EF)高达9.18×107,且SERS特征峰强度的偏差小于20%,即该基底具有良好的SERS性能,其灵敏度高且重复性和稳定性好。(2)基于新型固体基底,利用表面增强拉曼散射(SERS)技术详细研究了表面活性剂诱导下的ctDNA分子的压缩与解压缩。首先,得到了浓度低至10-9 M的小牛胸腺DNA(ctDNA)、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和十二烷基硫酸钠(SDS)的SERS光谱;其次,得到了表面活性剂分子与DNA分子相作用的SERS光谱,即,ctDNA-CTAB复合物和ctDNA-CTAB-SDS复合物的SERS光谱;再次,通过对比SERS光谱的变化,例如SERS谱带的消失、出现及强度的相对变化,分析了ctDNA分子与表面活性剂分子之间的相互作用,结果表明,CTAB导致了DNA分子的压缩,而SDS导致了ctDNA-CTAB复合物的解压缩;此外,利用紫外-可见分光光度法(UV-Vis)佐证了由表面活性剂引起的ctDNA分子的压缩与解压缩过程;最终,基于作用分子的空间结构,阐述了ctDNA分子与表面活性剂分子的局部结合方式。这项工作有助于理解细胞内DNA的压缩与重组等生物学过程,也有助于基因治疗技术的发展。
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