热消融联合过继性细胞免疫治疗恶性肿瘤的疗效及机制的研究

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目的:探讨热消融联合活化的功能性杀伤细胞(AFK)免疫治疗恶性肿瘤的疗效。方法:回顾性分析10例进行过热消融联合AFK细胞免疫治疗的恶性肿瘤患者的临床资料。评估患者的无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)、实验室检查和术后并发症。结果:联合治疗后无严重并发症,无肝肾损害。治疗局部缓解率90%。PFS中位数为12个月(0-25个月)。与消融前相比,消融后血红蛋白(P=0.023)、红细胞压积(P=0.034)和淋巴细胞比率(P=0.023)显著减低;中性粒细胞与淋巴细胞比率(NLR P=0.038)、中性粒细胞比率(P=0.016)、白蛋白(P=0.006)和碱性磷酸酶(P=0.029),CA-125(P=0.033),D-二聚体(P=0.011)显著增加。与联合治疗前相比,治疗后白细胞(P=0.003)、中性粒细胞(P=0.024)、淋巴细胞(P=0.003)显著增加,单核细胞比率(P=0.008)、嗜酸性粒细胞比率(P=0.005)显著减低。随访终点存活患者治疗后淋巴细胞增加更为显著(P=0.001)。联合治疗后CD3+细胞比例(P=0.016)和CD3+CD8+细胞比例(P=0.002)上升,CD3-CD16+CD56+(P=0.002)和 CD4+/CD8+(P=0.016)下降。结论:热消融联合活化的功能性杀伤细胞免疫治疗是一种安全、局部有效的治疗恶性肿瘤的方法。热消融治疗后,AFK细胞免疫治疗可能有助于预防某些肿瘤复发。目的:探讨微波消融联合活化的功能性杀伤细胞(AFK)免疫治疗晚期NSCLC的可行性和安全性。方法:对入组的6例晚期NSCLC患者行微波消融联合AFK细胞免疫治疗后进行初步评估,包括实验室检查、术后并发症和治疗局部的情况。结果:微波消融和AFK联合治疗后无严重并发症发生,无肝肾损害。与联合治疗前相比,联合治疗后血常规、肝肾功能、凝血功能、肿瘤标志物的变化没有统计学上的差异。联合治疗后,总T细胞、杀伤性T细胞、NK及NKT细胞比例均明显高于治疗前(p<0.05),辅助性T细胞比例低于治疗前(p>0.05)。结论:微波消融联合AFK细胞免疫治疗晚期NSCLC是一种安全和局部有效的治疗方法。目的:探讨微波消融治疗联合AFK细胞免疫治疗对小鼠肺癌远隔肿瘤的影响及其免疫学的变化。方法:在重度免疫缺陷小鼠B-NDG肺癌皮下瘤模型基础上,建立远隔肿瘤模型,进行两个实验:1.微波消融和AFK细胞免疫联合治疗肺癌远隔肿瘤的疗效评价;2.微波消融和AFK细胞免疫联合治疗与手术切除和AFK细胞免疫联合治疗的比较。观测小鼠及肿瘤生长情况,记录小鼠体重及肿瘤大小,检测小鼠外周血中回输的AFK细胞的比例及活性,实验结束时检测肿瘤中AFK细胞情况,并行大体解剖及病理学检查。结果:消融联合治疗(MWA+AFK)组小鼠总生存期较长,肿瘤生长速度慢于单消融组。相对于单消融组,联合治疗组的抑瘤率57.3%。联合治疗组的AFK细胞比例高于AFK组,回输后CD4+、CD8+T细胞消耗明显,T细胞活化程度高于AFK组。联合治疗组肿瘤组织及脾、外周血内CD8+T细胞近乎耗尽,肿瘤细胞增殖能力明显低于单消融组。MWA+AFK组肿瘤生长速度慢于手术联合治疗(Op+AFK)组,相对于Op+AFK组,MWA+AFK组的抑瘤率28.5%。T细胞活化程度MWA+AFK组高于Op+AFK组。结论:微波消融和AFK细胞免疫联合治疗不但可以消除肺癌原发肿瘤,还可以更好的抑制远隔肿瘤的生长。微波消融激活了回输后的AFK细胞。目的:应用iTRAQ技术研究消融治疗小鼠肺癌皮下瘤后血清差异蛋白表达,探讨消融治疗后外源性免疫细胞激活的机制及对肿瘤的作用。方法:选用9只5周龄SPF级雌性B-NDG小鼠,建立小鼠肺癌皮下瘤模型,在微波消融术前及术后采集外周血清,提取蛋白,使用iTRAQ技术进行蛋白质谱检测,通过筛选差异蛋白、GO富集以及KEGG信号通路富集等方法分析消融前后血清差异蛋白表达。结果:消融后释放入血的多种蛋白质片段成为外源性免疫细胞活化的抗原。与消融术前相比,消融后血清中表达的差异蛋白共300个,其中人类种属90个,小鼠种属210个。富集于代谢、死亡方式及肿瘤相关的多条通路上的相关差异蛋白,人类种属18个,其中表达上调7个,下调11个;小鼠种属29个,其中上调4个,下调25个。结论:消融后释放入血的多种肽段可以成为外源性免疫细胞活化的抗原。肺癌消融治疗后,可以激活多条信号通路,影响肿瘤的增殖、凋亡、转移及信号转导,或促进肿瘤进展,或加速肿瘤死亡。
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