苦荞叶黄酮提取纯化及其降血脂活性研究

来源 :天津科技大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:liujm1006
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苦荞麦是一种蓼科双子叶植物,富含生物类黄酮芦丁、糖醇等活性成分。研究表明黄酮类化合物具有降血脂、降血糖、抗氧化、抗癌等多种功效,是食品药品领域关注的热点之一。为了充分利用苦荞中黄酮类化合物,本文研究了苦荞叶黄酮的提取纯化工艺、苦养全叶及其醇提物对高脂膳食仓鼠血脂水平的影响。采用分光光度法对不同生长天数苦荞叶中总黄酮进行了测定。结果显示在播种第55天到第75天之间的苦荞叶黄酮含量最高达到10.74%/干重。采用高效液相色谱法检测苦养叶醇提物中的黄酮类化合物单体成分,色谱柱为C18柱,流动相为乙腈和0.4%的磷酸水溶液进行梯度洗脱,检测波长为360 nm。结果检测出苦养叶醇提物中主要含有芦丁、槲皮素两种黄酮类化合物。通过单因素实验、响应面优化实验,得到醇提法提取苦养叶黄酮的最佳工艺为:提取温度为70℃,液固比为27:1,乙醇的体积分数为59%,提取时间为3小时。得到粗提取物得率为44.74%,其中黄酮纯度为24.03%。筛选出对总黄酮纯化效果较好的D101大孔树脂,优化得到了苦荞叶黄酮的纯化工艺条件为:室温下湿法装柱,径高比为1:17,上样量为2 BV,控制流速为4 mL/min,上样浓度为0.86 mg/mL,然后用75%乙醇溶液3 BV进行洗脱。得到纯化品黄酮纯度为52.15%。将雄性仓鼠随机分为空白组、模型组、苦养全叶组和苦荞叶醇提物低、高剂量组共5组(n=8)。饲喂6周后眼底静脉丛取血,断颈处死,测定血清与肝脏中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和丙二醛(MDA)含量等指标。结果表明:与模型对照组相比,苦养全叶及其醇提物各剂量组仓鼠血清、肝脏和中TC、TG含量均极显著降低(P<0.01),粪便中TC、TG含量均极显著升高(P<0.01),血清中HDL-C极显著增高(P<0.01),动脉粥样硬化指数(AI)极显著降低(P<0.01),血清和肝脏中的MDA含量均极显著降低(P<0.01)。通过HE染色法对仓鼠肝脏的切片进行观察,发现苦养全叶或其醇提物可有效改善相应的病理症状。经上述实验证明,苦荞全叶及其醇提物具有降血脂的功效。
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