【摘 要】
：
[目的]探讨骨形态发生蛋白拮抗剂1（Gremlin-1）在肺腺癌中表达的临床意义,研究低表达Gremlin-1对肺腺癌细胞恶性生物学行为的影响;结合生物信息学分析探索Gremlin-1潜在的作用靶点及相关信号通路。[方法]1.下载TCGA数据库中肺腺癌患者的一般资料及临床病理信息。2.使用独立样本T检验对TCGA数据库中515例癌和59例癌旁组织中Gremlin-1表达量进行统计分析,使用配对样本
【基金项目】
：
云南省科技厅科技计划（2017FA039）； 云南省教育厅科学研究基金（2021Y341）；
论文部分内容阅读
[目的]探讨骨形态发生蛋白拮抗剂1（Gremlin-1）在肺腺癌中表达的临床意义,研究低表达Gremlin-1对肺腺癌细胞恶性生物学行为的影响;结合生物信息学分析探索Gremlin-1潜在的作用靶点及相关信号通路。[方法]1.下载TCGA数据库中肺腺癌患者的一般资料及临床病理信息。2.使用独立样本T检验对TCGA数据库中515例癌和59例癌旁组织中Gremlin-1表达量进行统计分析,使用配对样本T检验对58例成对的癌及癌旁组织中Gremlin-1表达量进行统计分析。3.收集2016年1月-2021年5月在云南省肿瘤医院胸外一科行手术的85例宣威地区肺腺癌患者资料,对收集的肺腺癌组织样本对Gremlin-1基因进行免疫组织化学染色,并进行统计分析。采用卡方检验分析Gremlin-1基因的表达与肺腺癌患者临床病理特征的关系。4.使用慢病毒载体稳定转染A549细胞株,并使用RT-qPCR检测转染效率:将生长状态好并且生长密度高的肺腺癌A549细胞株接种于6孔板内,待细胞密度生长至60-70%,使用慢病毒载体将Gremlin-1-Homo转染至A549细胞中;待转染48小时后使用RT-qPCR对转染效率进行验证;并按照2-ΔΔct公式计算Gremlin-1的相对表达量。5.细胞功能学实验:使用CCK8检测细胞增殖能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞的周期和凋亡。6.采用高通量测序技术分析敲低Gremlin-1后,差异基因的表达变化和可能密切相关的信号通路。7.随机将裸鼠分为NC组、shGremlin-1组,将shGremlin-1转染人肺腺癌A549细胞株,大量培养,制备细胞悬液。裸鼠皮下注射悬液,4周后将裸鼠处死,剥离肿瘤,测量肿瘤体积并称肿瘤的重量,拍照记录。[结 果]1.TCGA数据库中的肺腺癌样本中,Gremlin-1在肺腺癌组织中的表达较癌旁组织表达显著增高（P＜0.05）。2.免疫组化结果表明Gremlin-1在肺腺癌组织中的表达阳性率高于癌旁组织（P＜0.05）;Gremlin-1的表达与年龄、性别、肿瘤TNM分期等因素无明显统计学差异（P＞0.05）。3.敲低Gremlin-1的表达对肺腺癌A549细胞株的迁移、侵袭产生抑制作用。但对细胞周期、凋亡及体外增殖无统计学意义。4.高通量测序结果提示Gremlin-1可能存在细胞粘附、细胞增殖的正调控、蛋白结合等潜在调控因素,KEGG分析提示Gremlin-1可能与NF-κB信号通路有关。5.裸鼠成瘤实验结果提示敲低Gremlin-1不能抑制肺腺癌A549细胞在体内的增殖作用。[结 论]1.癌基因Gremlin-1在肺腺癌组织中高表达,促进肺腺癌侵袭转移能力。2.生物信息学分析提示Gremlin-1可能通过NF-κB影响肺腺癌恶性生物学行为。
其他文献
[目 的]探讨舒铂（Su-por）生物材料耳支架与自体肋软骨耳支架在全扩张法耳郭再造术中应用的特点,分析应用两种材料耳郭重建后的患者满意度、再造耳郭效果、手术时长及并发症发生情况,从而为耳郭再造支架材料的选择提供参考依据。[方 法]收集2020年11月至2022年1月昆明医科大学第二附属医院整形外科诊断为小耳畸形或耳郭缺损,并行全扩张法耳郭再造术的全部病例,年龄范围为6～26岁,根据患者及家属的意
芍药甘草汤加口服补液盐治疗急性腹泻４０例治疗组辨证分湿热与寒湿证：湿热者治以益脾敛肝兼清热利湿，方用芍药甘革汤加乌梅、葛根、滑石等；寒湿者治以益脾敛肝兼温中化湿，方用芍药甘草汤加于姜、毕拨、藿香等。取上方２剂，水煎成１０００ｍｌ；再取口服补液盐混合剂...
[目的]观察水胶体敷料减轻负压治疗烧伤瘢痕溃疡不良反应的效果。[方法]采用回顾性队列研究方法。选取昆明医科大学第二附属医院烧伤科2018年6月至2021年10月收治符合入选标准的下肢烧伤瘢痕溃疡患者27例,根据治疗方式不同分为应用水胶体敷料改良负压引流材料治疗组（观察组）11例、负压引流材料单独治疗组（对照组）16例。患者一般情况稳定后择期手术治疗,行瘢痕溃疡切除游离植皮术,对照组将负压引流材料聚
[目 的]探究hsa＿circ＿0084606在肝细胞癌中的表达水平及其临床意义;初步研究敲低hsa＿circ＿0084606的表达水平对肝细胞癌细胞生长增殖、DNA合成能力、克隆形成能力、细胞迁移能力和细胞周期等生物学功能的影响。[方法]1.首先设计环状RNA特异性扩增引物,利用实时定量PCR检测hsa＿circ＿0084606在45对肝细胞癌及其配对的癌旁组织样本中的表达水平,以2-ΔΔCt法
[目 的]SIRT1蛋白平衡失调与胃癌的发生发展密切相关,但其如何发挥作用仍不清楚。本研究主要研究目的是通过硝普钠（SNP）诱导高浓度NO环境模型,验证SIRT1蛋白是否发生巯基亚硝基化修饰,并探讨SIRT1蛋白的巯基亚硝基化修饰后与胃癌发展关系的相关机制,以期为胃癌治疗提供新的调控靶点。[方法]1.在体外形细胞培养后,以人正常胃黏膜上皮细胞GES-1为对照,使用实时荧光定量PCR技术检测人胃癌S
在经济社会稳步发展的过程中，人们对装饰装修提出了更高的要求。近年来陆续出现的新工艺、新材料虽然能满足人们对装饰装修的要求，但实际的设计中还面临诸多问题，严重影响了装饰装修效果。各建筑工程项目中相关人员需重视装饰装修设计，严格参照行业规范与标准，引进全新的设计理念和方法，提高装饰装修设计质量，为人们营造良好的室内环境。基于此，该文针对建筑装饰装修设计中的问题展开了详细分析，提出了相应的优化措施，以期
[目 的]通过向肺腺癌细胞A549和SPC-A-1中转染miR-18b-mimic和miR-18b-inhibitor构建瞬转细胞系,探索miRNA-18b对肺腺癌细胞A549和SPC-A-1增殖、凋亡、侵袭和转移等生物学特性的影响。探讨miRNA-18b作为肺腺癌骨转移早期诊断的分子标志物及治疗靶点的理论依据,进一步阐明miRNA-18b在肺腺癌骨转移发生发展过程中的功能和临床应用价值,为肺腺癌
[目的]周围神经浸润是结直肠癌转移和侵袭的标志,提示患者预后不良。而研究表明MDK是一个肝素结合性生长因子,在胚胎发育时期促进神经细胞生长发育。MDK在结直肠癌中的高表达目前已被证明与结直肠癌的侵袭,转移,耐药密切相关。因此肿瘤细胞分泌MDK可能调控神经生长相关信号,促进神经浸润的发生。本课题旨在探究MDK在结肠癌中促进背根神经节神经元轴突向肿瘤细胞生长。[方法]1.通过生物信息学方法,基于TCG
[目的]本研究旨在探讨KLK14在宣威女性肺腺癌组织中的表达,验证其对肺腺癌细胞生物学功能的影响,预测其在肺腺癌中发挥生物学功能的可能机制。[方法]1、本研究收集经手术切除的宣威非吸烟女性肺腺癌病人肿瘤组织和配对正常肺组织35对,并利用免疫组化技术检测KLK14蛋白水平的表达,比较两组间蛋白表达差异。2、采用Western Blot技术检测并比较人肺腺癌细胞系A549、XWLC-05、H1299、
[目 的]前期研究发现p62蛋白在骨巨细胞瘤（giant cell tumor of bone,GCTB）组织中高表达,体外下调p62蛋白表达能够抑制GCTB单核基质细胞增殖及侵袭,但相关调控机制不明确,并且,体内下调p62蛋白能否抑制GCTB增殖有待验证。本研究通过构建鸡胚绒毛尿囊膜移植瘤模型,观察下调p62蛋白对GCTB单核基质细胞胚内增殖的影响;并明确p62蛋白是否通过调控自噬影响GCTB单