【摘 要】
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本文从12株蛇足石杉(Huperzia serrata (Thunb.) Trev.)内生真菌中以石杉碱甲产量为指标,筛选出一株内生真菌。利用分子手段对该菌株进行了鉴定,同时对其生物特性和发酵条件
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本文从12株蛇足石杉(Huperzia serrata (Thunb.) Trev.)内生真菌中以石杉碱甲产量为指标,筛选出一株内生真菌。利用分子手段对该菌株进行了鉴定,同时对其生物特性和发酵条件进行了初步研究。得到的结论如下:1.通过薄层色谱法、高效液相色谱法和毛细管电泳法从12株蛇足石杉内生真菌中定性筛选出一株可能产生石杉碱甲或其类似物的菌株。2.运用湿室培养法对该菌株进行了显微观察,并记录了厚垣孢子、孢子和菌丝等显微结构。3.经过ITS序列测定比对,鉴定得出该株菌为柄孢壳菌属(Podospora sp.),其各单因子下的培养生物学特性为:最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为酵母浸膏,自然pH。4.对190号菌株以生物量为指标的发酵条件进行了优化研究,通过实验训练,运用人工神经网络法得到发酵试验模型。提出“实验结果均匀分析”法,大大减少了对因素之间由于不同水平的多次搭配产生的分析任务数量,且分析结果可靠。5.对190号菌株发酵产生石杉碱甲进行了HPLC检测,确定其发酵产物中含有石杉碱甲或者其类似物,但由于含量过少,目前没有得到石杉碱甲单体。6.对190号菌株的菌丝体和发酵液石油醚组分分别进行了GC-MS检测,分别得到30个化合物峰。菌丝体和发酵液的成分种类及含量差异均较大。7.对190号菌株的菌丝体和发酵液石油醚组分和氯仿组分分别进行了抗肿瘤活性检测。发现以石油醚做萃取相,组分中发酵液和菌丝体的抗肿瘤活性差异较大,前者的活性远远优于后者。而以氯仿做萃取相,发酵液的活性要低于菌丝体的活性。其机理有待进一步研究。
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