冬瓜子活性成分研究

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冬瓜子是一味传统中药。为了充分发挥我国冬瓜资源丰富,且其具有防治慢性炎症的优势,本论文对冬瓜子的化学成分以及在防治慢性炎症的作用方面进行了较深入地研究。为了明确冬瓜子所含成分的化学组成,本研究采用系统预测与系统分离的方法,根据冬瓜子中各成分的性质差异,利用显色反应、沉淀反应等化学方法进行分类研究,得出其主要含有大量油脂、皂苷及甾醇三大类化合物。然后分别进行如下研究:(1)以油脂的得率及感官特征为指标,采用回流提取法、索氏提取法、超声波提取法对其油脂提取工艺进行对比研究,研究得出索氏提取法提取效果较好。然后,采用正交试验对其工艺参数进行了优化。研究得出,在操作参数为:液料比12、提取时间2h,提取温度80℃时,冬瓜子油的得率较高,可达16%。最后,采用气相-质谱联用技术(GC-MS)对本工艺条件下所得油脂进行成分测定。检定分析出化合物共18种,其主要成分为不饱和脂肪酸,含量为85.88%,不饱和脂肪酸中亚油酸含量最高,为80.91%。(2)以甾醇的得率为指标,采用Liebermann-Burchard比色法进行含量监控,对皂化法提取冬瓜子油中植物甾醇的工艺进行研究。研究在单因素的基础上,通过响应面法优化出的工艺条件为:液料比8、提取时间3h、提取温度82℃、皂化液浓度2.5mol/L、皂化时间1h、皂化温度94℃。按此工艺,冬瓜子油中植物甾醇的得率为608.8μg/g。经高效液相色谱测定仪(HPLC)检测其纯度为96.9%;经GC-MS测定,检定分析出不同结构的植物甾醇共8种。(3)以皂苷得率为指标,采用Acid Anhydride-Concentrated SulfuricAcid比色法进行含量监控,对溶剂浸提法提取冬瓜子皂苷进行工艺研究。研究在单因素的基础上,通过正交优化出的工艺条件为:液料比13、提取时间2.5h、提取温度80℃、乙醇浓度75%。工艺稳定性试验,RSD为0.0174。按此工艺,冬瓜子皂苷的得率为0.85%。;经薄层色谱法(TLC)分析,在不同极性的展开系统中,均为单个斑点;经HPLC检测其纯度为93.8%。为了明确冬瓜子中起抗慢性炎症的活性成分及其作用效果,本研究采用动物实验的方法进行体内抗炎试验研究。研究以冬瓜子油、冬瓜子皂苷、冬瓜子甾醇为试验药物,以醋酸泼尼松为阳性对照,以检测降低二甲苯所致小鼠耳廓、甲醛所致小鼠足的肿胀程度,小鼠毛细血管通透性的影响为试验效应指标。通过与阳性药物比较得出:本试验方法正确,结果可靠;且冬瓜甾醇和冬瓜皂苷的抗炎效果均较好,但油脂组的作用效果不显著。通过与空白对照组比较得出:三者均可降低二甲苯所致小鼠耳廓和甲醛所致小鼠足的肿胀程度,抑制小鼠腹腔毛细血管通透性的亢进;但油脂组的作用效果相对较弱。由此得出结论:冬瓜子的化学成分为油脂、皂苷及甾醇三大类共27种化合物,皂苷及甾醇是其起抗慢性炎症的活性成分,作用效果可靠。
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