论文部分内容阅读
目的：IgA肾病（IgAnephropathy,IgAN），是世界上最常见的原发性肾小球疾病之一，临床表现多种多样。在我国，IgAN的发病率占原发性肾小球肾炎的25%～50%，其中1/3的患者的肾功能进行性恶化，并最终发展为终末期肾病（end-stage renal disease,ESRD）。但其发病机制尚不完全清楚。近年的研究发现上皮细胞-间充质转分化（epithelial-mesenchymaltransition, EMT）在IgA肾病肾间质纤维化发生、发展中起着不容忽视的作用。TGF-βl信号转导通路对肾间质纤维化及EMT的重要作用己得到公认，TGF-βl可以激活smads信号途径，也可以激活smads信号途径以外的信号传导。Notch信号转导通路是TGF-βl延迟激活的非smads信号途径，直接在邻近细胞之间精确地进行信号传递，调节着细胞的增生，分化，生长和凋亡等，并参与了许多肾脏疾病的发生发展。本课题旨在研究Notch信号转导通路在IgAN的肾间质纤维化中的变化和意义。方法：实验组来自河北医科大学第二医院肾内科于2011年6月到2012年8月期间经临床及肾活检病理诊断确诊为IgA肾病的患者38例（其中男性22例，女性16例，年龄14～60岁，平均年龄49±8.71岁），并除外紫癜性肾炎、系统性红斑狼疮、干燥综合征、乙肝相关性肾炎等继发性IgAN，除外合并心衰、感染、肥胖、妊娠、肝脏疾病、药物等导致的肾损伤及急性间质性肾炎等患者。病理诊断采用2009年国际肾脏病理协会组织制定的IgAN牛津病理分型。本实验分组：按牛津病理分型，有无肾小球硬化、肾小管萎缩或间质纤维化分为T00%～25%为轻度（G1，n=15，男：女=8:7，平均年龄37.93±15.873岁）；T126%～50%为中度（G2，n=15，男：女=9:6，平均年龄40.56±11.627岁）；T2>50%为重度（G3，n=8，男：女=5:3，平均年龄35.58±12.059岁）。对照组（C组，n=5例，男：女=3:2，平均年龄50±10.07岁）河北医科大学第二医院泌尿外科5例肾肿瘤做肾切除术但远离肿瘤部位的肾组织，均经光镜证实为正常肾组织。免疫组织化学方法定位检测肾组织中Notch1、Jagged1的表达并进行病理图像分析，计算阳性目标表达的平均光密度。酶联免疫吸附法检测IgAN患者外周血中的Notch1、Jagged1。同时测定血生化的临床指标：血清白蛋白（ALB）、血胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、24小时尿蛋白定量（Upro）、血肌酐（Scr）、尿酸（UA）及尿渗透压，并评估eGFR。所得到的实验结果数据均采用SPSS13.0软件系统进行统计分析。计量资料以均数±标准差（x±s）表示，检验为正态方差齐，用方差分析（ANOVA），非正态或方差不齐用非参数检验，多组间比较用Kruskal-Wallis H检验，相关性用Pearson相关性检验，P<0.05水准表示差异有统计学意义。结果：1性别与年龄：G1、G2、G3组与C组比较差异无统计学意义（P>0.05）。2尿蛋白定量：随着病情的进展，24小时尿蛋白定量增加，G1、G2、G3组与C组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；3血脂和血浆白蛋白水平：TG、TC、HDL-C、LDL-C和ALB在四组间均无统计学差异。4肾功能测定：IgAN各组间G1、G2、G3组与C组比较差异有统计学意义（P<0.05）；5Notch1与Jagged1免疫组化结果显示：①在对照组和实验组，Notch1和Jagged1在肾小管以近段肾小管为主表达，且实验组较对照组表达数量均增多；②在IgA肾病各组，随着病情的进展，Notch1和Jagged1在肾小管上皮细胞的表达越来越多，至分级为T2时最多；③在对照组，Notch1和Jagged1极少量表达。经统计学分析处理后得出：①在肾小管，Notch1和Jagged1IgA肾病组较正常对照组均增加，差异有统计学意义（P<0.05）；②Notch1和Jagged1在G3组表达最多，在G2组次之，各组间的差异有统计学意义（P<0.05）。6酶联免疫吸附法检测Notch1、Jagged1的结果显示：Notch1和Jagged1随着肾纤维化程度的加重表达也随之增加，Notch1各组间的差异有统计学意义（P<0.05），Jagged1的G2和G3组间的差异无统计学意义，其余各组间差异有统计学意义（P<0.05）。7相关性分析：发现Notch1表达分别与Jagged1表达、尿酸、Scr、24尿蛋白定量正相关（相关系数分别为r=0.869、r=0.440、r=0.633、r=0.598,P<0.01），与尿渗透压、 eGFR成负相关（相关系数为r=-0.612,r=-0.635, P <0.01），与ALB、BMI无统计学意义（P>0.05）。此外，Jagged1表达分别与尿酸、Scr、24尿蛋白定量正相关（相关系数分别为r=0.413r=0.836r=0.480, P<0.01），与尿渗透压、eGFR成负相关（相关系数为r=-0.573, r=-0.569,P<0.01），与ALB、BMI无统计学意义（P>0.05）。结论：在IgA肾病患者的肾组织及外周血中Notch1、Jagged1的表达随着肾小管萎缩增多、肾间质纤维化的发展表达增多，提示IgA肾病时肾脏的Notch/Jagged信号转导通路可能被激活，并且参与了肾小管萎缩、肾间质纤维化的发生和发展。