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目的和意义:
目前常用的氢氧化钙类盖髓材料对牙髓刺激性较强、生物相容性尚不理想,为了寻找更符合临床要求的盖髓材料,本课题分别设计了磷酸钙-磷酸镁(CPMP)和磷酸钙-硅酸钙-泡铋矿两种复合材料(CPCSBi),对其进行了一系列应用性能方面的基础研究,为盖髓材料更好地促进牙髓组织的自身修复潜能,提高受损牙髓的活髓保存成功率提供科学依据。
方法:
1.采用X射线衍射(XRD)技术,分析CPMP和CPCSBi主要物相组成,研究CPMP和CPCSBi的固化时间、抗压强度、pH值、溶解率、Ca2+累积释放浓度等物理机械性能;
2.采用原代培养人牙髓细胞琼脂覆盖法,研究CPMP、CPCSBi、Dycal和氢氧化钙糊剂(CH)的细胞毒性,并比较其对变性链球菌(Sm)、粘性放线菌(Av)等常见致龋菌的抑菌能力;
3.采用模拟体液(SBF)浸泡和显微硬度检测方法,研究CPMP、CPCSBi的生物活性及其对脱矿牙本质的再矿化诱导作用;
4.采用浸提法,研究在CPMP、CPCSBi和CH作用下从牙本质中溶出的可溶性牙本质基质成分(DDMCs)对牙本质涎磷蛋白(DDSP)、骨钙素(OCN)、转化生长因子β1(TGF-β1)基因表达的影响,探讨DDMCs在牙髓细胞分化和矿化中的作用;
5.采用动物盖髓实验,研究CPMP、CPCSBi和Dycal盖髓后牙髓组织病理学表现,X-射线能谱(EDS)分析修复性牙本质的矿化程度。
结果:
1.XRD分析CPMP的主要组成相为NHA4gPO4·6H2O、HA、MgO、Ca4O(PO4)2,CPCSBi主要包含HA、CaSiO3、Bi2O2CO3等物相;根据固化时间长短依次为CH>CPCSBi>CPMP>Dycal,抗压强度高低依次为CPMP>CPCSBi≈Dycal>CH,溶解率大小依次为CH>CPCSBi≈Dycal>CPMP,所有材料固化后均呈碱性,根据pH值高低依次为CH>Dycal>CPCSBi>CPMP,根据Ca2+累积释放量大小依次为CH>CPCSBi>Dycal≈CPMP。
2.CPMP和CPCSBi表现为轻度细胞毒性,Dycal和CH表现为中度细胞毒性。CPCSBi抑菌作用最强,对Sm、Av、嗜酸乳杆菌(La)和金黄色葡萄菌(Sa)的抑菌作用均明显强于Dycal和CH,CPMP抑菌作用较弱,仅对Av有抑制作用。
3.SBF浸泡后CPMP和CPCSBi表面均生成磷灰石沉积物,其中CPCSBi诱导磷灰石形成的生物活性更强,而Dycal未见磷灰石沉积物;CPCSBi能显著提高脱矿牙本质的显微硬度值,明显促进脱矿牙本质再矿化,而CPMP和Dycal也具有一定的再矿化促进作用。
4.CPMP、CPCSBi和CH从牙本质中溶出的DDMCs能促进与牙髓细胞分化和矿化相关的DSPP、OCN和TGF-β1基因表达,其中CPCSBi溶出的DDMCs促进作用更明显。
5.CPMP、CPCSBi盖髓7d无牙髓坏死组织形成,30d后穿髓孔部位有大量均匀、致密的修复性牙本质形成,牙髓组织基本正常,无坏死组织和明显炎性细胞浸润;Dycal盖髓7d,少量与Dycal直接接触的牙髓坏死,盖髓30d后形成含牙本质碎屑或牙髓细胞的修复性牙本质,牙髓组织充血较明显。X射线能谱分析(EDS)显示CPCSBi盖髓的修复性牙本质矿化程度高于CPMP或Dycal盖髓。
结论:
(1)与Dycal和CH相比,CPCSBi具有显著的抑菌性、生物活性和矿化诱导能力;
(2)与Dycal和CH比较,CPMP具有优异的的操作性和物理机械性能;
(3)与Dycal比较,CPMP和CPCSBi对牙髓组织无刺激,对牙髓细胞毒性小;
(4)CPMP和CPCSBi能有效促进修复性牙本质形成。
由此提示:两种新在盖髓治疗领域具有良好的开发和应用前景。