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目的:以PI3K/AKT信号通路为切入点,观察电针联合丰富康复训练对MCAO大鼠PI3K/AKT信号转导通路相关因子表达的影响,探讨其影响脑内血管新生以促进神经功能恢复的机制。方法:SPF级健康雄性SD大鼠随机分为假手术组（n=27）、造模组（n=81）,造模术后4h,将神经功能评分为1-3分的造模组大鼠随机分为模型组、针康组、抑制剂组（抑制剂结合针康法）,每组27只,各组按照脑缺血3d、7d、14d又分为三个亚组。参照Zea Longa线栓法建立局灶性大脑中动脉缺血动物模型。针康组于术后4h给予电针及康复治疗,电针选取“百会”、“风府”、“内关”、“心俞”四穴。每日1次。抑制剂组侧脑室注射AKT阻断剂后,进行电针联合康复训练干预。每日1次。假手术组和模型组不予干预。各组大鼠干预1d、3d、7d、14d后,采用神经功能缺损评分观察各组大鼠神经功能损伤情况;HE染色观察大鼠海马CA1区组织病理学改变;TTC染色法测量脑梗死面积;免疫组织化学法检测大鼠缺血侧脑组织VEGF、VEGFR2、PI3K、Akt阳性细胞的表达;Western blot检测VEGF、VEGFR2、PI3K、Akt在大鼠缺血侧脑组织中的表达;RT-q PCR法检测大鼠缺血区海马组织中PI3Km RNA、Akt m RNA、VEGFm RNA、VEGFR2m RNA、的相对表达量;Weidner法测定脑梗死区的微血管密度。结果:1.神经功能缺损评分假手术组神经功能缺损评分均为0分;模型组与假手术组比较,术后4h、3d、7d、14d神经功能缺损评分均显著高于假手术组（P<0.01）;与模型组比较,干预4h、3d两个时间点后,抑制剂组与针康组抑制神经功能缺损程度无统计学意义;干预7d、14d两个时间点后,抑制剂组与针康组神经功能缺损评分显著低于模型组,差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）;针康组与抑制剂组比较,干预7d、14d两个时间点后,差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。2.脑梗死体积检测假手术组未见梗死区,术后3d、7d、14d脑梗死体积均为0;与假手术组比较,干预3d、7d、14d三个时间点后,模型组脑梗死体积差异有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较,干预3d、7d、14d三个时间点后,针康组脑梗死体积显著小于模型组,差异有统计学意义（P<0.01）,干预7d、14d后,抑制剂组脑梗死体积小于模型组（P<0.01）;针康组与抑制剂比较,干预3d、7d、14d后脑梗死体积差异有统计学意义（P<0.01）。3.病理组织学观察HE染色结果所示,假手术组海马CA1区脑组织无水肿,层次分明,神经细胞无变性坏死现象,细胞结构形态正常,排列整齐,细胞基本无病变或坏死;模型组,大鼠缺血区海马CA1区脑组织可见明显水肿,大量神经细胞变性坏死、萎缩,细胞膜与核膜的边界不清,细胞之间的空隙增宽、排列不规则,伴有胞核破碎或消失现象。与模型组比较,术后7d、14d后,各干预组大鼠缺血区海马CA1区神经水肿现象均有不同程度减轻,神经元数量及新生血管数量均有增加,神经细胞的结构形态得到很大改善,逐渐趋于完整,提示针康法有利于促进血管新生现象;相较于抑制剂组,针康组大鼠脑组织海马CA1区神经元变性坏死的数量明显减少,神经细胞结构形态规整及神经元数量的改善明显于抑制剂组。4.免疫组化检测PI3K、Akt、VEGF、VEGFR2阳性表达与假手术组比较,干预3d、7d、14d三个时间点后,模型组缺血半暗带区PI3K、Akt、VEGF、VEGFR2阳性表达均显著增加（P<0.01）;与模型组比较,针康组干预3d、7d、14d后PI3K、Akt、VEGF、VEGFR2阳性表达均显著高于模型组（P<0.01或P<0.05）,抑制剂组干预7d、14d后PI3K、Akt、VEGF、VEGFR2阳性表达差异有统计学意义（P<0.01）;与抑制剂组比较,针康组干预3d、7d、14d三个时间点后PI3K、Akt、VEGF、VEGFR2阳性表达差异有统计学意义（P<0.01）。5.Western Blot检测PI3K/Akt/VEGF/VEGFR2蛋白相对表达量与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧三个时间点（3d、7d、14d）PI3K/Akt/VEGF/VEGFR2的相对表达量均显著增加（P<0.01）;与模型组比较,针康组大鼠干预3d、7d、14d后PI3K/Akt/VEGF/VEGFR2的相对表达量均显著高于模型组（P<0.01或P<0.05）,抑制剂组干预7d、14d后PI3K/Akt/VEGF/VEGFR2的相对表达量差异有统计学意义（P<0.01）;针康组与抑制剂组比较,干预3d、7d、14d后PI3K/Akt/VEGF/VEGFR2的相对表达量差异有统计学意义（P<0.01）。6.RT-q PCR检测PI3K/Akt/VEGF/VEGFR2m RNA与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧三个时间点（3d、7d、14d）PI3K/Akt/VEGF/VEGFR2m RNA的相对表达量均显著增加（P<0.01）;与模型组比较,针康组大鼠干预3d、7d、14d后PI3K/Akt/VEGF/VEGFR2m RNA的相对表达量均显著高于模型组（P<0.01或P<0.05）,抑制剂组干预7d、14d后PI3K/Akt/VEGF/VEGFR2m RNA的相对表达量差异有统计学意义（P<0.01）;针康组与抑制剂组比较,干预3d、7d、14d后PI3K/Akt/VEGF/VEGFR2m RNA的相对表达量差异有统计学意义（P<0.01）。7.缺血区微血管密度测定与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧三个时间点（3d、7d、14d）微血管密度均显著升高（P<0.01）;与模型组比较,针康组大鼠干预3d、7d、14d后微血管密度均显著高于模型组（P<0.01或P<0.05）,干预7d、14d两个时间点后,抑制剂组MVD差异有统计学意义（P<0.01）;与抑制剂组比较,针康组干预3d、7d、14d后微血管密度差异有统计学意义（P<0.01）。结论:1.电针联合丰富康复训练可有效促进MCAO大鼠神经功能恢复,减小脑梗死体积。2.电针联合丰富康复训练能够改善MCAO大鼠脑组织病理变化,增加大鼠缺血侧脑组织PI3K/Akt/VEGF/VEGFR2表达,从而增加MVD,这可能是电针联合丰富康复训练激活PI3K/AKT信号通路,诱导血管新生,从而恢复脑缺血后神经功能,发挥脑保护作用的机制之一。