高钙对大鼠肾上皮细胞的损伤效应及骨桥蛋白表达的影响

被引量 : 0次 | 上传用户:adu198612
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察高钙对大鼠肾上皮细胞(NRK细胞)的损伤效应以及对骨桥蛋白(OPN)表达的影响,探讨高钙尿在含钙肾结石形成中的作用和机制。方法:分别用含钙终浓度为1mg/ml、2mg/ml和3mg/ml的DMEM完全培养基培养NRK细胞(实验组1,2,3),空白对照组采用DMEM完全培养基,共同培养3小时、6小时和24小时后,采用CCK-8法检测细胞增殖;细胞培养上清液应用ELISA法检测细胞OPN的分泌情况;收集细胞,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;应用real timeRT-PCR法和Western Blot法,检测细胞OPN基因mRNA及蛋白的表达情况。结果:(1)空白对照组、实验组1、实验组2和实验组3培养3小时的吸光度值(OD值)分别为3.147±0.060、2.844±0.309、2.321±0.089、19.893±0.611,6小时为3.472±0.097、2.878±0.127、2.545±0.06、2.222±0.047,24小时为3.851±0.096、1.831±0.076、0.669±0.093、0.569±0.004,除实验组1在3h较空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)外,各实验组在不同时间点较对照组差异均有统计学意义(P<0.05)。各实验组内在不同时间点进行两两比较,除实验组1在3h和6h差异无统计学意义外,其他均有统计学意义(P<0.05)。(2)各组细胞在培养3小时后的凋亡率分别为2.36%、3.07%、4.53%、5.40%,6小时后的凋亡率分别为2.36%、4.75%、7.28%、7.83%,24小时后的凋亡率分别为2.36%、41.76%、56.84%、62.96%。(3)各组细胞培养3小时后上清液中OPN的含量(μg/ml)分别为10.461±1.573、14.820±1.213、17.150±0.841、19.893±0.611,6小时分别为10.461±1.573、23.791±1.518、26.307±0.876、28.607±0.733,24小时分别为10.461±1.573、26.882±1.100、28.948±1.818、24.377±0.641。三个时间点各实验组分别与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。同一实验组内在不同时间点进行两两比较,除实验组2在6h和24h差异无统计学意义(P>0.05)外,其余均有统计学意义(P<0.05)。(4)三个实验组在高钙干预3小时和6小时后细胞OPN蛋白相对表达量较对照组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。同一实验组内在不同时间点进行两两比较,除实验组2和实验组3在3h这一时间点差异无统计学意义(P>0.05)外,其余均有统计学意义(P<0.05)。(5)三个实验组在高钙干预3小时(6小时)后细胞OPN mRNA的相对表达量分别是空白对照组的2.803(9.989)倍,5.195(12.999)倍,8.380(27.929)倍,较对照组明显升高。结论:高浓度钙可明显抑制NRK细胞增殖,诱导细胞凋亡,细胞OPN基因表达上调,细胞分泌OPN增加。推测高钙尿可能通过诱导肾小管上皮细胞损伤和OPN的表达上调,促进尿液晶体与肾小管上皮细胞发生黏附,从而在肾结石形成中产生一定的作用。
其他文献
[目的]筛选蛇足石杉中石杉碱甲的酶法提取的最佳提取条件。[方法]采用纤维素酶酶解细胞壁,从而溶出更多的蛇足石杉细胞中的物质,并设计正交试验选出酶法提取的最佳提取条件。
介绍了低纬高原地区气候特点,分析了国外低纬高原地区主要国家发展现代农业的经验和教训,如印度农业的"三大革命"和农业信息化发展;巴西农业生物技术的应用;墨西哥"贸易自由
会计作为一项帮助企业实现核算和监督职能的重要经济管理活动,必然对其获得的会计信息有严格的要求。从会计与会计信息质量要求入手,在分析"实质重于形式"原则的内涵、重要性
目的:观察黄芪、莪术配伍对MKN-45细胞COX-2、PPARγ、NF-κB的影响.方法:以黄芪、莪术配伍作用于MKN-45细胞,并设塞莱希布组、罗格列酮组、黄芪组、莪术组和空白组相对照.用MT
2019年6月,《广东土木与建筑》编辑部接EBSCO通知,经过EBSCO有关部门的遴选和评审,以及3个月的试运行,《广东土木与建筑》从2019年第3期起,被美国EBSCO学术数据库正式全文收
随着近年来我国社会经济的不断发展,人们对交通条件的要求也在日益增加,相应我国高铁客流量也在不断增加,高铁车站的电扶梯应用也更为广泛。然而不可忽视的是每年在我国高铁
作物除了通过根系吸收养分外,叶片也能吸收养分,叶面施肥又称根外追肥或叶面喷肥,这种施肥是生产上经常采用的一种施肥方法。叶面施肥要及时针对不同情况而采用不同的管理方
德育是伴随我们一生的素质体现。近些年大学生道德缺失、德育素质低下问题越来越普遍,各高校也开始越来越重视德育教育工作,目的是为了培养学生形成优良的自律意识,为大学生
土壤有益微生物是维系土壤有机平衡、可持续发展的关键物质。微生物肥是在土壤有益微生物极度减少,化学物质大量侵蚀,养分匮乏,质地板结的情况下产生的一类土壤肥力间接补充
为了更准确地计算圆柱面切向接触刚度,本文考虑摩擦因素的影响,在圆柱面分形接触模型的基础上,引入存在摩擦时弹塑性变形的临界面积公式,并利用切向接触刚度的基本理论,推导