脯氨酰寡肽酶在小鼠卵巢黄体中的作用研究

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目的:  脯氨酰寡肽酶(POP)是一种特异性水解多肽链中脯氨酸残基羧基端肽键的丝氨酸蛋白酶,研究报道POP高表达于小鼠卵巢,但其在卵巢中的功能尚不清楚。本研究将探讨POP在小鼠卵巢黄体的表达和在黄体中的作用及其机制。  方法:  通过免疫组化和Western-blot检测POP在卵巢中的分布;分离原代黄体细胞进行体外培养,通过转染POP过表达质粒和POP抑制剂KYP-2047((2S)-1(((2S)-1-(1-Oxo-4-phenylbutyl)-2-pyrrolidinyl)carbonyl)-2-pyrrolidinecarboni trile)处理,通过CCK8检测POP对黄体细胞增殖的影响;通过放射免疫法检测孕酮和雌二醇表达水平的变化;通过荧光定量PCR和Western-blot检测POP对激素合成关键酶表达的影响和可能的信号通路。  结果:  免疫组化显示POP高表达于小鼠卵巢黄体细胞;POP过表达或 KYP-2047处理对黄体细胞活力没有明显影响;POP过表达促进了孕酮分泌,但对雌二醇没有明显影响,KYP-2047处理后孕酮和雌二醇的分泌量下降;进一步研究发现POP影响了黄体细胞类固醇合成关键酶的表达,包括CYP11A1、3β-HSD和StAR。SF1是调节黄体细胞激素合成的关键转录因子,POP过表达后SF1的表达水平上升,KYP-2047处理后SF1的表达水平下降。  结论:  1、POP高表达于小鼠卵巢黄体细胞;  2、POP促进了小鼠黄体细胞孕激素的合成;  3、POP通过刺激黄体细胞CYP11A1、3β-HSD和StAR的表达调节孕酮的分泌;SF1参与此过程。
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