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目的：研究p53反义RNA对p53基因突变的人肝癌细胞株的生长抑制作用，为肝癌的基因治疗提供实验数据和方法。
方法：含有2.1Kb的人p53全长cDNA的PBR322质粒用碱裂解法提取，将其与真核表达载体pCRTM3.1均经EcoRⅠ、XbaⅠ酶切电泳后，用试剂盒从凝胶中回收、纯化p53及载体片段。在T4DNA连接酶的作用下，将p53片段定向克隆于真核表达载体pCRTM3.1上，得到p53反义RNA表达载体pCRTM3.1-p53(AS)。将pCRTM3.1-p53(AS)与pCRM3.1在0.8％琼脂糖凝胶电泳及进一步酶切鉴定。用快速质粒DNA提取试剂盒提取、纯化pCRTM3.1、pCRTM3.1-p53(AS)质粒，紫外测其浓度与纯度。人肝癌细胞株Bel-7402，用抗p53蛋白，通过免疫组化法，鉴定为p53突变株。用脂质体转染的方法，将pCRTM3.1-p53(AS)、pCRTM3.1导入Bel-7402细胞，经G418筛选，并于未导入任何载体的Bel-7402细胞作比较。采用MTT法、FCM测定三组细胞生长曲线和细胞周期。
结果：Bel-7402/pCRTM3.1-p53(AS)细胞的增殖速度显著下降(P＜0.01)，FCM的结果证明，Bel-7402/pCRTM3.1-p53(AS)细胞，部分受阻于G0/G1期，而Bel-7402/pCRTM3.1细胞则无明显变化(P＞0.05)。
结论：p53反义RNA能抑制肝癌细胞生长。提示反义基因具有下调节Bel-7402细胞恶性表型的作用，可用于实验性肿瘤基因治疗。