CDX2(Caudal type homeobox transcription factor 2,C DX2)是肠道上皮特异性转录因子,可通过调节基因表达调控肠道上皮细胞增殖和分化。为研究CDX2对猪肠道上皮细胞增殖的影响,本试验首先以转染空质粒的IPEC-J2(porcine jejunal eptithelial cells)和CDX2过表达IPEC-J2为模型,运用细胞计数、MTT检测CDX2过表达对细胞增殖的影响;后以野生型IPEC-J2为模型,设计并合成CDX2 RNA干扰序列,检测CDX2干扰对细胞增殖的影响;最后以CDX2过表达IPEC-J2细胞株为对照,选用mTOR和Wnt信号通路特异性抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)和XAV939,分别进行单独及联合抑制处理,检测两个信号通路在CDX2促进细胞增殖过程中的作用。最后采用Western blot技术,分析CDX2和抑制剂处理对mTOR和Wnt信号通路关键蛋白表达的影响。为全面解析仔猪肠道CDX2基因的功能特点奠定基础。试验结果如下:(1)CDX2过表达可显著促进细胞增殖(P<0.05),CDX2干扰可显著抑制细胞增殖(P<0.05)。(2)CDX2过表达可显著上调mTOR和Wnt信号通路关键蛋白的表达水平(P<0.05);CDX2 RN A干扰可显著下调m TO R和Wnt信号通路关键蛋白的表达水平(P<0.05)。(3)mTOR和Wnt信号通路特异性抑制剂Rapamycin和XAV939显著抑制CDX2过表达细胞的增殖(P<0.05),两种抑制剂联合处理可进一步抑制细胞增殖(P<0.05)。(4)XAV939、Rapamycin以及二者联合处理都可显著抑制mTOR信号通路、Wnt信号通路以及CDX2的蛋白质表达(P<0.05)。结论:(1)CDX2可通过激活mTOR和Wnt信号通路促进猪肠道上皮细胞增殖;(2)mTOR和Wnt信号通路均参与调节CDX2合成;