分枝杆菌,经研究证实归为革兰氏阳性抗酸杆菌中的一类,作为常在菌生存于日常生活环境之中。分枝杆菌也可以分成许多种类,其中一类因为有共同的抗原蛋白可构成结核分枝杆菌复合群。大多数分枝杆菌的菌株生长极为缓慢,有些能够引起人和动物结核及结核样疾病。牛结核分枝杆菌特有的早期感染标识性分泌蛋白是MPB 70和MPB 83蛋白,它们主要应用于在菌株的鉴定和疫苗的研究之中。在利用DNAstar7.0软件综合分析牛型结核分枝杆菌早期标识性分泌性蛋白MPB 70和MPB 83抗原基础上,筛选确定了 MPB 70和MPB 83蛋白编码基因主要抗原域,利用重叠延伸PCR技术,构建了 MPB 70和MPB 83串联重组体。将其连接到原核表达载体pGEX-6p-1,进行诱导和表达。研究获得了一种具有抗原性的牛结核分枝杆菌感染早期标识物MPB 70和MPB 83分泌性蛋白的串联抗原,利用DNAstar7.0生物信息软件对牛结核分枝杆菌感染早期标识性分泌性蛋白MPB 70和MPB 83抗原结构区域进行预测,并设计合成克隆引物,构建重组后的载体得到了高效表达,再加上单克隆抗体的顺利制备,检测纯化后重组蛋白的纯度及抗体效价表达。该实验获得了具有抗原活性的牛结核分枝杆菌感染早期分泌性蛋白串联抗原MPB 70+MPB 83,为后续进一步研发牛结核分枝杆菌早期感染标识物快速检测试剂盒奠定了坚实的研究基础。