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长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)可以通过许多种机制来发挥它的生物学功能,这些机制主要包括基因印记和染色质的重塑、调控细胞的周期和调控基因的剪接以及调控mRNA降解和mRNA的翻译等。IncRNA通过这些作用机制在不同水平进行基因表达调控。实验室前期研究发现了一个新型的长链非编码RNA基因,我们暂时命名为Z38。已证实LncRNAZ38基因高表达于肿瘤组织,低表达于癌旁组织。本研究的目的在于探讨稳定干扰LncRNAZ38基因的表达对人鼻咽癌细胞HNE1、5-8F功能和机制的影响。主要在细胞水平和分子水平上进行研究。具体开展了以下工作:(1)采用包埋shRNA-Z38的慢病毒转染进人鼻咽癌细胞HNE1与5-8F中,经嘌呤霉素筛选,获得稳定干扰的鼻咽癌细胞系。(2)采用实时荧光定量PCR方法在鼻咽癌细胞HNE1与5-8F中检测LncRNA Z38的表达水平。(3)使用MTT、平板克隆集落形成实验验、Transwell实验检测干扰LncRNA Z38表达后鼻咽癌细胞HNE1、5-8F的增殖能力和细胞迁移能力的变化。(4)采用蛋白质印迹(Western blot)的方法检测干扰LncRNA Z38表达后鼻咽癌细胞HNE1、5-8F中抑癌因子p53、p21表达水平的变化。实验结果表明,慢病毒载体介导的RNAi技术干扰鼻咽癌细胞后,显著降低了 LncRNA Z38基因的表达水平,干扰LncRNA Z38基因在鼻咽癌细胞中的表达。后通过一系列肿瘤细胞功能学实验,在细胞水平上证实了干扰LncRNAZ38的表达后,鼻咽癌细胞的增殖能力、集落形成能力降低,穿过Transwell小室的细胞数降低。后通过蛋白质印迹法检测到干扰LncRNAZ38的表达后,鼻咽癌细胞中抑癌因子p53、p21表达量上调。此结果与我们的假设一致,Z38基因是癌症相关基因之一。