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目的本研究旨在构建稳定转染人组织因子(TF)的人胃癌细胞株(SGC7901)并初步研究TF对胃癌细胞体外侵袭力的影响,为进一步探讨胃癌细胞的转移机制提供实验基础。方法1采用巢式PCR技术自人胎盘组织克隆TFcDNA,并构建重组人组织因子真核表达载体TF-pcDNA3.1。应用脂质体介导的转染技术将其导入人胃癌细胞株SGC7901,采用G418筛选稳定表达TF的细胞。2应用流式细胞术及RT-PCR检测TF的表达水平。3分别进行Transwell实验,观察细胞体外侵袭能力的变化。结果1构建的重组质粒TF-pcDNA3.1经Xba I/HindⅢ双酶切后,1.2%琼脂糖凝胶电泳,出现约5.4kb和900bp 2个片段,与预期结果相符。同时由上海生工生物工程技术服务有限公司完成基因测序,与TF的cDNA序列相符,说明载体构建成功。2稳定转染成功的SGC7901/TF细胞内TFmRNA表达水平明显增高,在β-actin表达无统计学差异的情况下,实验组(4.28±0.37)明显高于阴性对照(1.12±0.32)及空白对照组(0.99±0.29)(F=97.2,P<0.01)3 SGC7901/TF细胞表面TF抗原(66.12%±5.09%)表达显著增高,与阴性对照(10.75%±1.49%)及空白组(10.31%±1.83%)比较有统计学差异(F=294.3,P<0.01)。4与阴性对照(38.33±2.52)及空白对照组(38.00±2.65)相比,实验组细胞(48.67±2.52)的体外侵袭力增强(F=16.8,P<0.01)。结论1经基因测序证实本研究成功构建了稳定、高效表达TF的人胃癌细胞系SGC7901/TF。2通过Transwell实验初步证实TF能够增强胃癌细胞的体外侵袭能力。3人胃癌细胞系SGC7901/TF为进一步研究TF在肿瘤转移中的作用建立了实验基础。