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昆虫病原线虫是一类新型的生物防治因子,已经被广泛地应用到生产实践中。但是作为一类活体病原微生物,昆虫病原线虫受自然条件的影响较大。因此,筛选昆虫病原线虫抗逆优良品系以及开展线虫抗逆基因功能研究对于其更好的推广和应用具有十分重要的意义。在本实验中,针对以上研究内容进行了系统研究,结果如下:1、对19种昆虫病原线虫品系分别进行高、低温及干燥处理,旨在筛选出抗逆性较好的线虫品系。结果表明经40℃高温条件处理6h时后Steinernema ceratophorum HQA-87和S.carpocapsae ALL 死亡率最低,分别为 4.19%和1.89%,说明这两个线虫品系的高温抗性最好。在对线虫进行低温(-5℃)处理后,S.carpocapsae ALL和S.sp ZLS-3的线虫死亡率最低,分别为1.93%和0.3%,抗低温性能最好。在抗干燥实验中,抗逆性最好的是S.carpocapsae ALL,死亡率为1.34%。通过上述不同的抗逆性测定实验,筛选出6个线虫优良品系S.carpocapsae ALL、S.ceratophorum HQA-87、Heterorhabditis beicherriana LJ-24、S.tielingense LFS-65、H.bacteriophora HQ-4 和 S.hebeiense JY-20。所筛选出的6个线虫品系经逆境条件处理后再次测定对大蜡螟的致病力,最终确定S.carpocapsae ALL和S.ceratophorum HQA-87为高抗逆性优良线虫品系。2、采用26个线虫品系对3种金龟子(大黑鰓金龟、暗黑鳃金龟和铜绿丽金龟)的初孵幼虫、1龄及2龄幼虫进行生物测定,结果发现H.bacteriophora HQ-4、H.bacteriophora KF-63、H.beicherriana LJ-24 及 H.bacteriophora NT-1 对大黑鰓金龟对初孵幼虫杀伤效果最好,死亡率分别为100%、100%、94.44%和92.86%;H.indica HNN-2、H.beicherriana LJ-24&H.bacteriophora KF-63对其1龄幼虫的致死作用最好,试虫死亡率均为100%;H.bacteriophora HQ-4及H.sp NCWZ-1对其2龄幼虫的致死效果最好,试虫死亡率分别为60%和58.33%。H.beicherriana HDT-54、H.bacteriophora NT-1、H.sp NCWZ-1、H.beicherriana LJ-24和H.bacteriophora HQ-4对暗黑鰓金龟初孵幼虫杀伤效果最好,死亡率均达到100%;H.beicherriana LJ-24、H.bacteriophora HQ-4、H.beicherriana HDT-54、H.bacteriophora NT-1及H.sp NCWZ-1对其1龄幼虫的致死作用较好,试虫死亡率均为 100%;H.beicherrianaLJ-24、H.bacteriophora NT-1、H.beicherriana HDT-54 和H.bacteriophora HQ-4 对其 2 龄幼虫的致死作用最好,试虫死亡率均为100%。H.indica HNPY-2、H.bacteriophora HQ-4 及H.sp NCWZ-1对铜绿丽金龟初孵幼虫杀伤效果最好,死亡率分别为100%、81.82%和 72.73%;H.bacteriophora NT-1 和H.bacteriophora HQ-4 对其 1 龄幼虫杀虫效果最好,试虫死亡率分别为100%和78.57%;H.beicherriana LJ-24和H.bacteriophora NT-1对其2龄幼虫致死作用最好,死亡率分别为97.5%和100%。综合分析可知,异小杆属线虫对于蛴螬类地下害虫防治效果好于斯氏线虫属,其中H.bacteriophora HQ-4、H.sp NCWZ-1、H.beich errianaLJ-24 和 H.bacteriophora NT-1可以作为防治蛴螬的优良线虫品系。3、以带角斯氏线虫S.ceratophorum HQA-87为研究对象,在进行高温、低温和干燥条件处理之后,采用荧光定量PCR测定HSP20、HSP90、CHI、SC450、SC3602、SC1309、CL1317、SC4783、SC1476、SC1825、CL5542、CL497、CL3276、SC5348、CL6144和SC7883共16种抗逆性基因的表达量差异。实验结果表明HSP20、HSP90、CHI、SC450、CL497、SC4783、SC1476、CL5542 和 SC3602基因在高温条件下相对表达量上调,SC7883和SC1309基因在低温时相对表达量上调,SC3276、CL1317、SC1825、SC5348和CL6144等基因在干燥条件时相对表达量上调。4、为了研究昆虫病原线虫体内的抗逆性机制,以线虫S.ceratophorum HQA-87为研究对象,选取HSP20和CL6144基因采用RNAi技术进行功能验证。结果表明,HSP20基因沉默处理后该线虫经高温、干燥及低温条件处理后死亡率分别为60.21%、62.20%和67.29%,其中高温处理组线虫死亡率与对照组差异显著,可初步得出HSP20基因与线虫耐高温抗性有关。CL6144基因沉默处理后线虫经高温、干燥及低温条件下处理后死亡率分别为19.5%、7.9%和87.3%,其中高温处理组线虫死亡率与对照组差异显著,说明CL6144基因与线虫耐高温抗性有关。这两个基因沉默后线虫对大蜡螟致死力与对照组相比没有区别,说明抗逆性基因与线虫致病力不相关。