血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌生长曲线及细胞内钙离子浓度的影响

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目的:研究血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis P.g)生长曲线的影响。探讨血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌细胞内钙离子浓度的影响。方法:1.将血链球菌标准株ATCC10556复苏并扩增培养后,通过离心、破碎等方法提取血链球菌细胞内有效抑菌物质,即血链素。2.血链素与牙龈卟啉单胞菌细菌悬液于37℃、厌氧环境下培养48小时,采用微量液体对倍稀释法测定血链素对牙龈卟啉单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)。3.选用不同浓度的血链素作用牙龈卟啉单胞菌,分别于0、4、8、12、16、20、24、48h时测定各组细菌悬液在590nm波长处的光密度值(OD),以时间为横坐标,OD值为纵坐标绘制牙龈卟啉单胞菌的生长曲线图,研究血链素对牙龈卟啉单胞菌生长曲线的影响。4.采用激光共聚焦技术及钙离子荧光探针(Fluo-3/AM)方法观察血链素对牙龈卟啉单胞菌细胞内钙离子浓度的影响。结果:1.血链素对牙龈卟啉单胞菌有显著抑制作用,其MIC为0.0625g/L。2.血链素作用后,牙龈卟啉单胞菌的生长曲线在8~16h发生明显改变,对数生长期被推迟8个小时。3.血链素作用后,牙龈卟啉单胞菌细胞内钙离子浓度显著降低,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:1.血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌有明显的抑制作用,在本实验范围内,随着血链素浓度的升高其抑制作用逐渐增强。2.血链球菌细菌素可导致牙龈卟啉单胞菌细胞膜钙离子通透性增强。
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