不同年龄阶段大鼠正中隆起Nestin和Sox2阳性细胞的观察

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:haoxiaoye
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目的:观察出生后不同发育阶段大鼠正中隆起Nestin和Sox2阳性细胞的分布和形态结构的变化。方法:雄性健康SD大鼠,青年组(8周龄)和成年组(24周龄)各12只,共24只。麻醉后,经心脏灌注4%多聚甲醛磷酸缓冲液(0.1mol/L,p H7.2)。其中取青年组和成年组各6只,常规脱水、浸蜡、包埋,切片后,用免疫组化检测正中隆起处Nestin的表达,另取青年组和成年组各6只,常规脱水、浸蜡、包埋,切片后,用免疫组化检测正中隆起处Sox2的表达。1标本制备:将正常组用水合氯醛(0.3ml/100g)麻醉后,自主动脉灌注4%多聚甲醛磷酸盐缓冲液(0.1mol/L,PH7.2)进行前固定,立即取脑,后固定,经脱水,透明,包埋,选取含正中隆起部分,石蜡切片机冠状面切片,厚度约为5μm,制成石蜡切片。对实验动物的处置符合动物伦理学要求。2免疫组织化学染色:将上述石蜡切片分别经Nestin和Sox2免疫组织化学染色,苏木精复染后,使用中性树胶封片后,用Olympus BX-UCB观察照相。3统计学处理:同一倍数的照片,各选取相同长度室管膜层和相同深度,统计相同面积下阳性细胞数,计算阳性率。结果:1 Nestin免疫组织化学结果观察:Nestin免疫阳性细胞在ME处明显表达,在青年组ME室管膜带和内带的中央部呈强阳性分布,在成年组ME室管膜和内带的中央部、外侧部都呈强阳性分布,基突由背侧向腹侧走行,止于外带的软膜下或血管壁周围。青年组阳性细胞表达率35.51±1.88%,成年组阳性细胞表达率57.63±4.90%。两组有明显差异,P<0.01。2 Sox2免疫组织化学结果观察:Sox2免疫阳性细胞在ME室管膜带单层整齐分布,青年组ME的外侧部呈强阳性,成年组ME少量、弱阳性分布。青年组阳性细胞表达率44.30±3.50%,成年组阳性细胞表达率31.40±4.03%,两组有明细差异,P<0.01。结论:1 Nestin免疫阳性细胞主要分布于ME的室管膜带、内带,胞体发出的长突起背腹走向,基突止于外带软膜下或血管旁。成年组较青年组阳性细胞数量多,青年组的中间部比外侧部阳性表达强。2 Sox2免疫阳性细胞在青年组ME室管膜带外侧部密集分布,成年组ME阳性细胞稀疏分布;青年组较老年组阳性细胞数量多。
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