低强度脉冲超声在Beagle犬牙槽骨及颌骨缺损模型中促进骨质修复的初步研究

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牙槽骨缺损是牙周病主要病理学特征之一,如何有效促进牙槽骨的再生修复一直是牙周病治疗的关键。以往的治疗方法,如牙周刮治术、植骨术、膜引导骨再生技术(Guided Bone Regeneration,GBR)局部应用生长因子以及牙周组织工程等,虽然有一定的治疗效果,但还有待于进一步的提高。低强度脉冲超声(Low Intensity Pulsed Ultrasound,LIPUS)作为一种安全无创的治疗手段,具有促进骨创伤再生修复的作用,临床上已用于促进新鲜骨折愈合和治疗骨不连。目前,LIPUS促进骨质再生修复的研究主要集中在骨折愈合和牵张成骨领域,而LIPUS对牙周病组织修复的研究在国内外还处于起步阶段。因此,本研究以牙周手术方式建立Beagle犬下颌前磨牙牙槽骨缺损模型,结合自体骨植骨术的考虑,并以Beagle犬下颌骨骨质缺损模型为辅助对照,初步探讨单纯应用LIPUS在牙槽骨和颌骨缺损修复中的生物学效应,为LIPUS在牙周病治疗的临床应用研究提供前期的实验对照和依据。一、LIPUS在Beagle犬下颌前磨牙牙槽骨缺损模型中促进骨质修复的初步研究。选用2只成年雄性Beagle犬,以下颌双侧第三、第四前磨牙为研究对象,牙周手术方法去除实验牙颊侧釉牙骨质界下6mm牙槽骨,建立牙槽骨缺损模型,随机一侧为实验组,另一侧为对照组,实验组每天LIPUS(ISATA 30mW/ cm2,频率1.5MHz,调制信号波宽200μs,重复率1KHz)辐照20min,共处理8周。牙周临床指标检查(牙龈指数GI、牙周袋深度PD、附着丧失AL)显示LIPUS辐照处理8周后,实验组牙周临床情况稍好于对照组;双能X线骨密度(BMD)测定示:实验组为0.6689±0.0598g/cm2,高于对照组(0.6353±0.0600 g/cm2);组织学分析(HE、MASSON染色)示:实验组新生牙槽骨中骨胶原红染明显,呈红蓝相间,软骨灶周围的骨质红染程度较对照组深,红染面积大,钙化程度较高较对照组高。本实验影像学和组织学分析显示LIPUS可增加新生牙槽骨的钙化程度和骨质密度,促进新生骨组织结构的改建和成熟,提示特定参数的LIPUS对牙槽骨修复有一定的促进效应,其具体的作用机制尚需要进一步研究。二、LIPUS在Beagle犬下颌骨骨质缺损模型中促进骨质修复的初步研究。以手术方式在2只雄性Beagle犬下颌骨左右两侧分别建立一直径5mm,深4mm的圆形骨质缺损,随机一侧为实验组,另一侧为对照组,实验组每天LIPUS(ISATA 30mW/ cm2,频率1. 5MHz,调制信号波宽200μs,重复率1KHz)辐照20min,共处理6周。双能X线骨密度(BMD)测定:实验组BMD均值为0.5141g/cm2,对照组均值为0.4425g/cm2。扫描电镜显示:实验组新生骨小梁较对照侧致密、粗壮,基质钙化程度较对照组高,形成的新生骨质与正常骨组织结构更为相似。X线能谱钙磷元素比值测定(Ga/P):实验组为1.546±0.0951,对照组为0.92±0.1370,提示实验组新生骨质钙化程度高于对照组。组织学分析(MASSON染色):实验组新生骨组织红染明显,呈红蓝相间结构,钙化程度较高,与正常的颌骨骨组织结构较为相似,成骨细胞周围骨陷窝大且明显。而对照组新生骨质主要为蓝色的类骨质,胶原红染较少,钙化程度较低,只是形成了胶原化的类似软骨结构。实验结果提示:特定参数的LIPUS可促进Beagle犬下颌骨缺损修复区钙盐的沉积,增加骨质密度,加快正常骨组织结构的建立。综上所述,LIPUS在Beagle犬牙槽骨及颌骨缺损修复过程中可加快钙盐沉积,促进新生骨质结构的改建和成熟,缩短成骨修复时间。因此,本实验提示LIPUS作为一种有效的骨修复促进因素,可引入GTR/GBR、植骨术、牙周组织工程等其他牙槽骨再生修复手段,联合应用,以提高牙周病牙槽骨再生修复的临床治疗效果。
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