NGF基因修饰的雪旺细胞在慢性神经损伤后修复中的作用

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目的观察神经生长因子(NGF)基因修饰的雪旺细胞(Schwann Cells, SCs)在慢性神经根嵌压伤后神经修复中的作用。方法使用半植块单酶消化法培养SCs并以腺病毒为载体将NGF基因转染SCs。选取成年雌性SD大鼠32只,建立右侧腰4.5.6神经根慢性嵌压伤的动物模型,随机分为4组行如下相应的治疗:1.生理盐水(NS)对照组;2.单纯SCs组;3.Ad-NGF组;4.SCs+NGF组。治疗术后2周切取神经根组织,行Western blot检测神经根组织裂解液内NGF前体(proNGF)含量;免疫组化观察神经纤维再生及proNGF基因体内表达;双标记荧光免疫组化法分别计数脊神经节(DRG)内β-Tubulin III(β微管蛋白Ⅲ)及ATF3(转录激活因子3)阳性细胞,计算存活神经元密度及损伤神经元所占比率。结果Western blot结果显示:SCs+NGF组神经根组织裂解液内proNGF含量显著增加(P<0.01);免疫组化DAB染色显示:外源性SCs可以在体内长期存活并形成新的髓鞘,proNGF基因在其内稳定表达;双标记免疫荧光染色显示:SCs+NGF组与其它组别相比较,DRG节内神经元(β-TubulinⅢ阳性细胞)密度明显增加(P<0.01),损伤神经元(ATF3阳性细胞)比率显著降低(P<0.01)。结论NGF基因修饰的SCs在慢性神经根嵌压伤后的神经修复中具有显著促进神经纤维再生,提高DRG内神经元存活率并降低受损神经元比率的作用,为慢性神经嵌压伤后的神经修复提供了新的治疗策略。
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