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海南是我国比较重要的甘蔗生产省份,甘蔗也是海南重要的经济作物,甘蔗病毒病是甘蔗生产最主要的限制因素之一。由于此前对海南甘蔗花叶病病原病毒尚无分子水平的系统鉴定,本论文就此进行了以下方面的研究：由海南地区病株上获得一个病毒分离物SrMV-HN,通过生物学、电镜观察、血清学测定,理化性质及质谱分析,鉴定该分离物为高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus, SrMV)。接种实验证明该病毒分离物可以侵染玉米、甘蔗。电镜观察表明SrMV-HN分离物粒子呈弯曲线状,无包膜,螺旋对称结构,大小为800±50nm×13±2nm。理化性质和质谱分析结果表明：标准沉降常数为160-175S,浮力密度(氯化艳中)1.285-1.342g/ml,提纯病毒的A260/280=1.20。并对病毒提取液进行SDS-PAGE分析和蛋白质质谱分析。SDS-PAGE获得SrMV外壳蛋白单一肽段,分子量35.68kD。通过MALDI-TOF-TOF质谱分析,确认该病毒为高粱花叶病毒(SrMV)。利用RT-PCR的方法和特异性引物扩增到基因组中987bp左右的片段,编码329个氨基酸。序列测定显示所克隆的DNA片段,包含了完整的高粱花叶病毒外壳蛋白基因,与已报道的高粱花叶病毒其它分离物序列同源性达95%,94%,93%。以提取的SrMV免疫家兔,获得了对SrMV高度特异、效价为1：25000的抗血清。并可以用此抗血清进行SrMV的抗血清的ELISA检测。ELISA测定结果表明,分离物与SrMV抗血清呈阳性反应。本研究对海南不同甘蔗种植区开展了调查,采集了69个样品。通过实验建立了较为完整的SrMV检测体系,包括：1、优化并建立了三抗体夹心酶联免疫检测方法(TAS-ELISA),并通过稀释抗原测试了SrMV抗血清的灵敏性和稳定性。2、根据GenBank已报道的序列,设计引物,通过对引物的灵敏性和特异性实验,建立SrMV RT-PCR检测方法。3、利用SYBR Green I染料法建立了高粱花叶病毒实时荧光RT-PCR检测技术,4、建立起鉴别高粱花叶病毒(SrMV)、甘蔗黄叶病毒(ScYLV)多重PCR诊断方法.实验结果表明,本实验建立的多重PCR诊断方法具有很好的敏感性和特异性,能够对病毒进行快速的鉴别及诊断。本实验建立的SrMV检测体系能对甘蔗病毒样品进行快速鉴别及诊断,为病原体的诊断提供了一种新的方法,同时也为海南甘蔗病毒的检测、脱毒种苗培育、病毒流行学以及基础病毒学等方面的应用和研究奠定了新的基础。