高脂饮食能改变肠道微生物群,促进与肥胖相关的炎症,而绿茶多酚(GTPs)对肥胖和肠道炎症有预防作用,但其作用机制及其与肠道微生物群的关系尚不清楚。因此,本研究以GTPs治疗肥胖症和肠道炎症为背景,探讨GTPs对肠道微生物群的作用及其抗炎机制。本试验选取30只13-14月龄、健康雄性比格犬,正常饲养1个月后随机分为5组,每组6只。以低(0.48%)、中(0.96%)、高(1.92%)剂量的GTP喂养试验犬18周,夜间空腹12小时后采集血液样品。分离血清,于-80℃下保存,用于分析炎性细胞因子。试验结束时,每组随机选择4只犬,按体重分别用盐酸甲苯噻嗪(1.5mg/kg,IM)和(20mg/kg,IV)硫喷妥钠(Abbott)麻醉,放血致死。打开腹腔,收集肠内容物,立即保存于福尔马林和液氮中,用于进一步分析。采用高通量测序技术测定肠道微生物变化;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肠道炎性细胞因子mRNA的表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肠道炎性细胞因子含量;免疫印迹法检测Toll样受体4(TLR4)、环氧合酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达水平;苏木精-伊红(H&E)染色检测肠道组织验证变化。试验结果显示:试验结果显示:1.与高脂饮食组相比,GTPs降低了拟杆菌和梭杆菌的相对丰度,并增加了厚壁菌的相对丰度。氨基酸球菌属、厌氧螺菌属、厌氧弧菌、类杆菌、布劳特氏菌属、环杆菌、柠檬酸杆菌、梭状芽胞杆菌以及大肠杆菌的相对比例与GTP诱导的体重下降显著相关。2.与正常饮食组相比,高脂饮食组中TNF-α,IL-6和IL-1 β的mRNA表达显着(P<0.05)或极显著(P<0.01)增加;与高脂肪饮食组相比,GTPs添加组TNF-α、IL-6和IL-1 β mRNA表达水平显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)降低。与正常饮食组相比,高脂饮食组的TNF-α浓度显着升高(P<0.05);与高脂饮食组相比,GTPs高剂量组中TNF-α浓度显着降低(P<0.01)。与正常饮食组相比,高脂肪饮食组的IL-6浓度显着升高(P<0.01);与高脂肪饮食组相比,GTPs高剂量组中IL-6浓度显着降低(P<0.05)。高脂饮食组与正常饮食组IL-1 β浓度差异不显著;然而,与高脂饮食组相比,GTPs高剂量组的IL-1 β浓度显著降低(P<0.01)。3.GTP还抑制TLR4信号传导途径。与高脂饮食组相比,添加GTP可抑制犬肠道组织中Cox-2的表达,高脂饮食组显着增加COX-2的表达(P<0.05)。此外,结果显示,在连续饲喂GTP 18周后,GTPs高剂量组中iNOS水平显着降低(P<0.05)。4.正常饮食组肠壁结构完整,黏膜形态无异常,具有完整的单柱状上皮。在高脂肪饮食组中,小肠(回肠)壁显着延伸并且绒毛内乳腺扩张,而饲喂GTP的犬没有表现出炎症或淋巴管扩张,且在高GTP剂量组中可清楚地观察到派尔斑。综上所述,GTPs的治疗作用与肠道微生物丰度和肠道炎症的变化有相关性,这可能与GTPs的抗炎和抗肥胖机制有关。同时,试验结果表明,高脂饮食会改变肠道微生物多样性,导致肥胖和炎症,而添加GTPs对肥胖和肠道内环境失调具有显著改善作用。