传统的生物制品包括疫苗、抗血清、免疫应答产物、血液、血液制品及血液制品衍生物。随着生物技术的进步,生物制品所包含的范围较传统定义有了很大程度的扩展,最主要的体现在现代生物制品的内容包括了诊断和治疗用的细胞因子和抗体、体细胞和基因以及人源和异源组织。由于生物制品大多数来源于活供体产生的有生物活性的合成物质,而这类物质又多是具有生物传染源性质,所以在其生产、销售及之后的处理过程中,要受到严密的评估和监管,以其保证生物制品的安全性和有效性。这些评估体系包括为达到生物制品的质量要求所采取的计划、监测及校正等作业技术和活动,即质量控制。质量控制主要包括原材料的生物安全性评估,生物制品纯化过程的反应活性及残留污染物检测等。生物制品的残留物质中的残留蛋白包括真核宿主细胞蛋白、原核宿主细胞(如大肠杆菌)蛋白、鸡胚来源蛋白、培养介质中血清蛋白成分(如牛血清白蛋白)等。在国外许多公司和研究机构采取多种方法来减少这些残留蛋白成分从而进行质量控制,同时采取了高度敏感可靠的方法对这些质量控制的结果实施检测。近年,我国也对这些残留蛋白在生物制品中残留量的上限进行了规定,但是相关研究工作与国外比较相对滞后,现有许多检测方法水平较低,难以满足科研及市场发展需要。本研究的第一部分采用大肠杆菌菌体蛋白免疫家兔,制备得到抗菌体蛋白兔多克隆抗体。应用饱和硫酸铵、阴离子交换柱层析和亲和层析方法纯化的兔抗大肠杆菌菌体蛋白多克隆抗体,纯化后标记生物素,并经亲和素放大系统放大。在国内首次建立了亲和层析方法纯化的兔抗大肠杆菌菌体蛋白多克隆抗体检测大肠杆菌菌体蛋白的ELISA方法,敏感性为0.32μg/L,检测范围在1-100μg/L,批内CV小于7.7%,批间CV小于6.2%,具有良好的稳定性,敏感性与检测范围与国际同类商品化检测试剂盒接近。此外,本实验还采用大肠杆菌菌体蛋白免疫小鼠并制备得到抗菌体蛋白小鼠的单克隆抗体33株。经质谱分析鉴定出抗大肠杆菌菌体蛋白成分中分子伴侣GroEL的单克隆抗体,并且抗体可以用来通过免疫沉淀的方法,从大肠杆菌菌体蛋白中分离出这一分子,为进一步研究分子伴侣GroEL的结构和功能提供了新的手段。本研究第二部分是以牛血清白蛋白免疫小鼠,用含有马血清的培养基制备得到抗牛血清白蛋白的小鼠单克隆抗体11株,经饱和硫酸铵和阴离子交换层析纯化后标记辣根过氧化物酶(HRP),通过夹心配对ELISA法筛选出夹心ELISA最佳包被和检测抗体,在国内首先建立了以单克隆抗体检测牛血清白蛋白的夹心ELISA方法,敏感性为0.38μg/L,检测范围在0.5-40μg/L,批内和批间变异系数均小于10%。采用这一方法检测牛血清白蛋白,比国外单克隆抗体试剂盒敏感高10倍,与国外多克隆抗体试剂盒相当。总之,本研究成功制备了抗牛血清白蛋白的单克隆抗体和抗大肠杆菌菌体蛋白多克隆抗体,建立了检测牛血清白蛋白的基于单克隆抗体的夹心ELISA方法和检测大肠杆菌菌体蛋白的亲和层析多克隆抗体夹心ELISA方法,鉴定了大肠杆菌菌体蛋白成分GroEL单克隆抗体的部分用途,为进一步检测生物制品中残留蛋白的质量控制和相关研究打下扎实的基础,具有良好的应用前景。