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背景与目的：抑郁症是一类常见病，临床上主要表现为患者对日常活动和娱乐的兴趣减退、对前途悲观失望、容易焦虑、睡眠质量较差等，迄今，人们对抑郁症的发病原因以及发病机制还不是很清楚，但是可以肯定的是，其发病有生物、心理以及社会环境等内外因素的参与。近年来，有研究提示miRNAs与精神疾病有关联，其可能在精神疾病的发生、发展中起着十分重要的角色。有研究发现miR-134的表达水平在BD躁狂相病人的血液中降低，然而miR-134的表达水平在癫痫持续状态（status epilepticus，SE）造模成功的大鼠模型中上升，并且在内侧颞叶癫痫（Mesial Temporal LobeEpilepsy，MTLE）病人中也同样检测到miR-134表达水平的升高。目前的研究主要是证实了miR-134异常表达与精神疾病有关，但是对精神疾病中miR-134的精细调控机制的研究还十分有限。如果想要更加深入地了解miR-134发挥的作用，我们需要建立细胞或动物模型，在细胞及动物水平检测其引起的病理生理改变。本课题的目的在于构建miR-134真核质粒表达载体和慢病毒载体，并且将构建好的质粒和慢病毒转染至OL（oligodendroglia，人类少突胶质瘤）细胞、SD大鼠海马神经元中，为研究抑郁症的分子机制提供有效的实验工具。方法：1.用PCR的方法从OL细胞基因组中扩增含有miR-134基因的目的片段，并将miR-134基因的PCR产物和载体pEGFP-N1连接以构建pEGFP-miR-134载体，经酶切、测序证实之后采用Invitrogen公司的Lipofectamine LTX和Plus Reagents转染试剂盒将质粒瞬时转染至OL细胞中，提取总RNA,在基因水平检测miR-134在OL细胞中的表达变化。2.取出生24h内的清洁级SD乳鼠，断头后分离提取海马神经元，采用无血清培养基培养神经元，为后期在海马神经元中进行的细胞活力实验、细胞凋亡实验及突触可塑性实验奠定良好基础。3.构建Lenti-miR134-EX慢病毒表达载体，并包装、纯化慢病毒，经鉴定慢病毒包装成功后将其感染SD大鼠海马神经元，提取总RNA,在基因水平检测miR-134在海马神经元中的表达变化。结果：1.从OL细胞基因组中成功扩增出含有miR-134基因的目的片段，并将其连接到载体pEGFP-N1，命名为pEGFP-miR-134，且转染OL细胞效果较好。2.用简单的方法即可分离培养出高纯度（可达90%以上）的海马神经元。3.成功包装了能够表达绿色荧光蛋白的慢病毒载体，命名为Lenti-miR134-EX。结论：本课题成功构建了miR-134真核质粒表达载体和慢病毒载体，并获得瞬时转染的OL细胞以及SD大鼠原代海马神经元，为深入研究miR-134在抑郁症的精细调控机制提供了有效的工具和平台。