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本论文主要是针对我国牛奶中存在抗生素残留,且检测体系不够完善的现象,建立了牛奶中氟喹诺酮类药物残留检测的高效液相色谱法、微生物法和酶联免疫吸附试验法,并对其进行了比较性研究,确定了不同检测方法的适用范围,以便为不同规模的乳品企业以及质量监督部门提供理论依据和技术参考。1建立了牛奶中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星三组份残留检测的高效液相色谱法。样品经磷酸盐缓冲液提取,过固相萃取柱净化,洗脱,洗脱液经微孔滤膜过滤,采用荧光检测器检测,外标法定量。恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星在0.005～0.5μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9997～0.9998;最低检测限为0.005μg /mL,在添加浓度为0.050μg/mL、0.100μg/mL、0.200μg /mL时的平均回收率水平分布在71.5%～83.8%,CV均低于10%,符合残留检测要求。2建立了牛奶中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星三组份残留检测的微生物法-杯碟法,以枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌和短小芽孢杆菌为工作菌。根据一剂量法设计原理,通过检测三种药物在磷酸盐缓冲液中的最低检测限和在牛奶中的最低检测限,以及回收率的大小,确定了检测三种药物的最适工作菌为枯草芽孢杆菌。结果表明:对于三种药物,枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、藤黄微球菌的最适菌层浓度分别为0.8%、0.1%、0.5%;三种药物在磷酸盐缓冲液中的最低检测限分布在0.025～0.5μg/mL;在牛奶中的最低检测限分布在0.03～0.6μg/mL,标准曲线线性关系良好,相关系数都大于0.98,平均回收率分布在63.2～81.0%,精密度良好,CV均小于10%,能够满足残留检测要求。3建立了牛奶中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星三组份残留检测的酶联免疫吸附法。利用美国Beacon公司研制的试剂盒,原理是间接竞争ELISA方法。牛奶样品经二氯甲烷提取、离心后,取下层液体用氮气吹干,进行测试,最后,在450nm处测量吸光度值,吸光度值与样品中的氟喹诺酮药物浓度成反比。结果表明:该试剂盒用来检测牛奶中氟喹诺酮类药物完全可靠,最低检出限能达到0.002μg/mL,回收率在60～70%之间,CV小于10%。4综合三种检测方法的特异性、批量检验的速度、检验成本等比较看,高效液相法适合对样品的准确定性和定量;微生物法适合对大量样品的筛选和定量,不能定性;酶联免疫吸附法适合对大量样品进行快速筛选。