论文部分内容阅读
前言:
结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)是1991年由Bradham等首次在人的脐静脉内皮细胞的条件培养基中发现的,CTGF属即刻早期基因CCN家族的一员,是由即刻早期基因编码的基质相关的分泌性蛋白,在血管形成和肿瘤的生长中起各种不同的作用。CCN蛋白家族有共同的分子结构,能调节各种细胞的功能,如调节细胞分裂、趋化性、细胞凋亡、附着、能动性、血管生成、离子运输等。近来,研究发现CTGF的表达与某些肿瘤的发生和进展有关,越来越多的证据显示,CTGF可以调节癌细胞的转移、侵袭、血管生成和凋亡。
本研究观察CTGF在人体银屑病、某些皮肤恶性肿瘤等组织中的表达情况,并以正常皮肤组织作为对照,初步分析CTGF在上述皮肤病中可能的作用。
材料和方法:
一、研究对象
1、病例组临床资料完整的进展期寻常型银屑病组织20例,鳞状细胞癌(BCC)组织、基底细胞癌(SCC)组织各14例,全部来自中国医科大学附属第一医院皮肤科。
2、对照组正常皮肤组织14例,全部来自中国医科大学附属第一医院整形外科,无系统性疾病或其它皮肤病。
二、材料
1、兔抗人CTGF多克隆抗体
2、即用型SABC免疫组化试剂盒
3、3-二氨基联苯胺(DAB)显色系统
三、实验方法
制备5u厚石蜡切片。抗原高压热修复。先后滴加兔抗人多克隆抗CTGF一抗,BSA封闭液、生物素化羊抗兔IgG和SABC,PBS作阴性对照。DAB显色,苏木素复染。脱水、透明、封片。光镜下观察。
四、结果判定
光镜下(×400倍),每张切片随机选取4个视野,以细胞膜或胞浆内出现棕黄色或棕褐色颗粒为阳性。采用半定量积分法,对细胞中阳性细胞的染色强度及阳性细胞数进行人工判定;显微图像分析系统采集图像,分析阳性表达面密度和积分光密度值,取平均值,获得每例标本阳性染色的面密度和积分光密度值。
五、统计学分析
采用SPSS16.0软件包进行数据处理。分类资料采用X2检验,计量资料采用LSD-t检验。P<0.05认为有统计学差异。
结果:
1、20例银屑病组织中,19例呈高表达(位置),1例弱表达,阳性率为95%;14例BCC组织中,12例呈高表达,2例弱表达,阳性率为85.71%;14例SCC中,11例呈高表达,3例弱表达,阳性率为78.57%;14例正常皮肤有2例弱表达。
2.银屑病、BCC、SCC阳性表达分布情况均与对照组织(正常皮肤)具有统计学差异。银屑病与两种恶性皮肤肿瘤间阳性表达无统计学差异,两种恶性皮肤肿瘤间表达无统计学差异。
3、银屑病组织面密度及积分光密度值最高,分别为18.06%及4769.18;正常皮肤组织最低,分别为1.13%及1077.40;BCC和SCC界于银屑病和正常皮肤中间。
4、银屑病、BCC、SCC的面密度及积分光密度值均与对照组织(正常皮肤)具有统计学差异。银屑病与两种皮肤恶性肿瘤之间无统计学差异。两种皮肤恶性肿瘤之间无统计学差异。
结论:
1、CTGF在银屑病、BCC、SCC组织中呈高水平表达。
2、CTGF在正常皮肤组织中呈低水平表达。