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目的:从中医玄府与肾小球足细胞的相似性立论,以瞬时受体电位离子通道5(TRPC5)、TRPC6及其信号通路为靶点,研究发汗法和固摄法治疗嘌呤霉素氨基核苷(PAN)肾病的疗效及机制,探索玄府理论在肾病蛋白尿治疗中的分子基础。方法:实验动物为80只雄性Wistar大鼠,根据体重随机分配至正常组、模型组、越婢汤组、固精方组。采用首剂静脉注射PAN 90mg/kg模拟微小病变(MCD),随后分别于第13、16、19、22、25天追加PAN 9mg/kg建立局灶节段硬化(FSGS)模型,造模周期分别为2周和12周。检测血清生化指标及尿蛋白肌酐比,Westernblots、Real-time PCR、免疫荧光染色分析TPRC5、TRPC6表达及分布,Westernblots检测其下游信号通路蛋白RHoA、Rac1及足细胞结构分子Nehprin、Podocin、Synaptopodin表达,共聚焦显微镜观察足细胞骨架蛋白F-actin的表达,HE、Mssson、PAS染色后光镜观察肾脏病理变化,电镜观察足细胞足突融合情况。结果:1.与正常组比较,PAN大鼠造模2周出现低蛋白血症、蛋白尿、高脂血症、腹水等肾病综合征表现,病理符合微小病变;12周大鼠出现低蛋白血症,蛋白尿及肾组织FSGS病理表现,两阶段TRPC5、TRPC6、RHoA、Rac1表达均上调(P<0.05),足细胞结构蛋白 Nephrin、Podocin、Synaptopodin 表达减少(P<0.01),骨架蛋白F-actin表达下降(P<0.05)以及足突融合。2.MCD阶段,与模型组比较,越婢汤组与固精方组尿蛋白排泄均降低;血清胆固醇、甘油三酯下降,血清白蛋白升高;TRPC5、TRPC6表达下调(P<0.05),其中越婢汤组TRPC5mRNA转录水平较固精方组低,而固精方组TRPC6 mRNA水平则比越婢汤组下降(P<0.05)。Nephrin、Synaptopodin、F-actin蛋白表达升高(P<0.05),中药干预组足突融合均较模型组有所改善(P<0.05)。RHoA、Rac1、Podocin蛋白表达与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3.FSGS阶段,固精方组尿蛋白排泄率较模型组降低(P<0.05),而越婢汤组蛋白尿虽然有下降趋势但差异无统计学意义(P>0.05);两组血清白蛋白升高;TRPC5、TRPC6蛋白及mRNA表达下调、RHoA、Rac1蛋白表达同样下调,Synaptopodin则表达升高(P<0.05)。固精方组Nephrin、F-actin蛋白表达较模型组增高(P<0.05),两组Podocin蛋白水平与模型组比较均无统计学差异(P>0.05),两组中药干预后肾小球足突融合均减轻。结论:越婢汤和固精方可降低PAN肾病大鼠蛋白尿、升高血清白蛋白,其机制可能为通过分别调控TRPC5与TRPC6减轻足细胞损伤。TRP通道可能是调控玄府开阖的重要分子和发汗法与固摄法的作用靶点。