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慢性萎缩性胃炎(Chronic Atrophic Gastritis,CAG)及胃癌前病变(Precan-cerous lesions of gastric cancer, PLGC)在我国人群临床发病率高,它需经过一个漫长的、多阶段、多基因的变异积累过程而发展成胃癌。目前“正常胃黏膜→浅表性胃炎→萎缩性胃炎、肠上皮化生→不典型增生→胃癌(肠型)”的病变模式被广泛接受。中医药治疗PLGC具有可靠的疗效和较大优势,积极有效地开展对PLGC的干预阻断(二级预防)对胃癌的防治具有重要意义。在导师姚乃礼主任医师指导下,经课题组长期研究,认为“脾虚毒损络阻”是PLGC的基本病机,以“健脾通络解毒”为本病的基本治则,可明显改善患者临床症状,并对病理组织学有一定的减缓逆转作用。针对本病设立健脾通络解毒法基础方,其主要由太子参、白术、茯苓、莪术、藤梨根、白花蛇舌草、浙贝母、甘草等组成。太子参、白术、茯苓、甘草健脾益气,莪术、活血祛瘀通络消积,藤梨根、白花蛇舌草、浙贝母解毒化痰散结,上药配伍,共奏“健脾益气、活血通络、消积解毒”之功。经前期临床观察表明,该法不但能明显改善PLGC患者临床症状,还能促进部分患者胃黏膜病变的镜下及病理向愈,在临床上取得较好的疗效。研究目的观察健脾通络解毒法干预PLGC的临床疗效；探讨健脾通络解毒法对PLGC细胞凋亡的影响作用；重点揭示健脾通络解毒法通过调控NF-κB> Bcl-2、Bax等分子、蛋白靶点对PLGC细胞凋亡的影响作用机制；分析PLGC证候相关因素与细胞凋亡及NF-κB、Bcl-2、Bax等指标之间的相关性。研究方法：本研究主要包括临床病例观察及实验研究两个部分。依据临床诊断及纳入标准入组40例PLGC患者,予健脾通络解毒方药干预治疗6个月,应用免疫组化、RT-PCR、原位末端标记法(TUNWL)等技术,检测治疗前后组织病理变化,细胞凋亡指数,凋亡信号通路(NF-κB/Bcl-2)上相关基因、蛋白表达(Bcl-2、Bax、NF-κB)等指标的变化；制定临床病例观察表,采集PLGC患者治疗前后症状变化及内镜下表现,进行统计分析,探讨其疗效以及证候相关因素,与组织病理、细胞凋亡等各指标间的相关性。研究结果1.临床症状：患者经健脾通络解毒法治疗6个月后,临床主症、次症及总体症状积分有明显下降(P<0.01)。主要症状明显改善以胃脘痞满为主,胃脘疼痛和情志症状积分也明显改善。患者从首诊到疗后第3个月总体症状积分减少,其改善的幅度有46.6%左右,第6个月患者总体症状积分改善的幅度有69%左右。2.证候因素：依据患者临床四诊信息,40例PLGC患者主要的证侯因素分布以气虚、气滞、血瘀、湿、毒、气郁等为主。其中,气虚占97.5%-100%、气滞占95%-97.5%、血瘀占97.5%-100%、湿占55%-70%、毒占17.5%-47.5%、气郁占25%-40%。经健脾通络解毒法治疗后“毒”这个证候因素所占比例有明显下降,患者的舌象、脉象、胃镜下黏膜征象等均有明显改善。3.胃镜下表现：患者的胃镜下黏膜萎缩比例在经过6个月治疗后均较明显改善；疗前有7例患者胃镜下黏膜萎缩比例达到Ⅲ级(占22.2%),疗后病患在胃镜下黏膜萎缩达到Ⅲ级的未见。入组病例治疗前后胃镜下征象积分变化明显,胃窦小弯和胃角均侧变化为著,经统计学分析均存在显著性差异(P<0.01)。4.病理组织学：入组病例治疗前后病理积分有明显变化,以胃窦小弯部位为著,其经统计学分析,存在显著性差异(P<0.01)。胃窦加上胃角的疗前疗后胃镜下征象积分有明显降低,(P<0.05)。患者治疗前后病理萎缩及肠化所占比例均有明显变化,治疗前萎缩程度有16例重度(占44.4%)、肠化程度有23例重度(占63.9%),而治疗后萎缩程度有4例重度(占11.1%)、肠化程度有13例重度(占36.1%)。疗前有17例患者存在轻度不典型增生(占47.2%),疗后则不典型增生患者下降到5例(占13.9%)。5.免疫组化蛋白表达：经健脾通络解毒法治疗后,NF-κB阳性表达率降为80.6%、Bcl-2阳性表达率降为50%、Bax阳性表达率略为升高86.6%。经统计分析,治疗前后NF-κB积分与Bcl-2积分有明显变化,二者均存在治疗前后的差异,NF-κB (P<0.01)、Bcl-2(P<0.01), Bax积分有略升高变化,但无显著性差异(P>0.05)。6.细胞凋亡指数(TUNEL法)：经健脾通络解毒法治疗后细胞凋亡指数(AI)值较治疗前有减低变化,但经统计学分析,二者无显著性差异(P>0.05)。7. RT-PCR mRNA表达：Bcl-2mRNA转录水平在治疗前表达为0.27±0.18,治疗6个月后Bcl-2mRNA转录水平表达为0.18±0.12,数值有所减低,经统计学分析,两者之间有显著性差异(P<0.05)。8.证候因素与各指标间关系：与免疫组化指标间关系如下：①NF-κB在气虚、气滞、血瘀、内湿证候因素患者中,治疗前后的阳性表达比率差异明显,具有显著统计学意义(P<0.01)；在毒这个证候因素中,治疗前后的阳性表达比率差异也具有统计学意义(P<0.05)。②Bcl-2在气虚、血瘀、内湿证候因素患者中,治疗前后的阳性表达比率差异明显,具有显著统计学意义(P<0.01)；在气滞证候因素中,治疗前后的阳性表达比率差异也具有统计学意义(P<0.05)；而在“毒”证候因素中,治疗前后的阳性表达比率差异无统计学意义(P>0.05)。③Bax在气虚、气滞、血瘀、内湿证候因素患者中,治疗前后的阳性表达比率差异无统计学意义(P>0.05)；在毒证候因素中,治疗前后的阳性表达比率差异具有统计学意义(P<0.05)。9.证候类型与免疫组化指标间关系：脾胃虚弱、脾胃湿热、胃络瘀阻证型中NF-κB、Bcl-2的阳性表达比率在治疗前后存在明显差异,具有显著的统计学意义(P<0.01),在肝胃不和中NF-κB、Bcl-2的阳性表达比率在治疗前后存在差异,具有统计学意义(P<0.05)。另外,Bax在肝胃不和中的阳性表达比率在治疗前后存在差异,具有统计学意义(P<0.05)；但是在脾胃虚弱、脾胃湿热、胃络瘀阻证型中,对治疗前后Bax的阳性表达比率进行比较,其差异无统计学意义(P>0.05)。研究结论：1.纳入的PLGC患者证候因素特点与“脾虚毒损络阻”的核心病机一致。2.“健脾通络解毒法”能够显著改善PLGC患者的主要临床症状,提高患者的生存质量。3.“健脾通络解毒法”可以明显改善PLGC患者胃黏膜萎缩、肠化、不典型增生等组织病理变化。从观察病例分析判断,该方有逆转胃癌前病变不典型增生的作用。4.“健脾通络解毒法”及其方药可通过促进细胞凋亡而对CAG伴肠上皮化生(IM)或伴有不典型增生(Dys)起到一定的治疗作用,从而达到预防PLGC向GC发展的作用。5.“健脾通络解毒法”及其方药可通过调节NF-κB来降低胃黏膜细胞内的Bcl-2含量,并调控Bcl-2与Bax的比值,从而可能有效抑制胃黏膜细胞的增殖,导致Dys等有害细胞凋亡的增强。