泥鳅多糖的分离、纯化及其抗氧化活性的研究

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泥鳅(Misgurnus angillicaudatus Cantor)系鳅科动物,肉或全体入药,收载于《中药大辞典》。泥鳅的营养价值很高,对许多疾病确有疗效,但目前关于泥鳅药用的有效成分(或部位)以及用现代方法对泥鳅进行炮制加工和药理作用机制的探讨较少。本文从泥鳅粘液、表皮、全身中提取到水溶性多搪,研究了泥鳅多糖的提取工艺、纯化及对所得组分进行了纯度鉴定,并用H2O2/Fe2体系法和AP-TEMED体系法研究了马齿觅多糖半纯品及精制多糖清除超氧阴离子自由基和轻基自由基的抗氧化活性。采用传统的多糖提取方法,即碱液浸泡提取,乙醇沉淀,沉淀无水乙醇、丙酮反复洗涤,真空干燥得泥鳅多糖粗制品。确定用酶法切断蛋白链,结合经典的化学法(Sevag法),对泥鳅粗多糖进行脱蛋白处理。脱蛋白后的多糖经透析得多糖纯品(MAP)。从泥鳅粘液、表皮、全身中分离提取到中性的多糖,采用凝胶过滤色谱柱在高效液相色谱仪检查提取多糖的纯度,表明提取的多糖为单一组分。MAP经UV扫描,无核酸(260nm)和蛋白质(280nm)特征吸收峰。IR扫描表明有典型多糖吸收峰。主要是研究泥鳅分泌、表皮、全身多糖对O2-·和DPPH·的清除作用。利用H2O2/Fe2体系产生DPPH·,AP-TEMED体系产生O2-·,分别比较了泥鳅分泌、表皮、全身多糖对·OH和O2-·;的清除率。结果表明,MAP具有抗O2-·和DPPH·的双重功效,且呈剂量依赖关系。在实验条件下,泥鳅全身、分泌和表皮多糖对DPPH·自由基都有较强的清除作用,在多糖浓度为0.6ug/ml时,其分泌、表皮、全身多糖对DPPH·消除率分别为65.1%、81.2%、91.2%;泥鳅全身、分泌和表皮多糖超氧自由基O2-·都有较强的清除作用,在多糖浓度为1.2ug/ml时,其分泌、表皮、全身多糖对O2-·消除率分别为72.1%、85.7%、86.3%,提示泥鳅多糖具有良好的抗氧化性能。
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