大鼠骨髓间充质干细胞培养、鉴定、SPIO标记及MRI活体示踪的实验研究

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:taodenmy
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目的分离、培养、鉴定及SPIO标记大鼠BMSCs,探讨MRI对其在大鼠脑创伤模型活体示踪成像中的可行性。方法1.全骨髓贴壁培养法分离培养大鼠BMSCs,流式细胞仪检测细胞表面抗原及向成脂、成脂诱导分化进行鉴定,并探讨首次换液模式对BMSCs培养时间及细胞纯度的影响。2.以左旋多聚赖氨酸(PLL)为转染介质介导导BMSCs吞噬SPIO,评价SPIO对细胞生物学特性的影响,探讨最佳SPIO浓度。3.参照Feeney法制作大鼠TBI模型,经右侧经总动脉穿刺插管注射移植SPIO标记的BMSCs。4.实验组大鼠注射移植SPIO标记BMSCs,对照组TBI大鼠注射等量的无SPIO标记的BMSCs或PBS,均分别于注射细胞前及注射BMSCs后1d、3d、7d、14d、21d进行NSS评分及MRI扫描,观察脑实质内信号变化及其迁移情况,并与对侧正常脑实质信号进行对比。每次MRI扫描结束后立即各处死1只,取脑组织切片进行HE及普鲁士蓝染色。结果1.BMSCs生长状态良好,培养时间较短,纯度较高,CD29、CD90阳性,CD34、CD45阴性,向成骨、成脂诱导分化,SOIO标记后细胞生物活性良好。2.MRI扫描可观察到实验组TBI模型大鼠脑实质内低信号区,并逐步向病变区迁移,与对侧脑实质内信号减低率结果具有统计学意义(F=154.19,P<0.05),病理切片普鲁士蓝染色见蓝染颗粒。BMSCs移植组NSS评分低于PBS移植组,结果有统计学意义(P<0.05)。结论1.全骨髓贴壁法培养BMSCs生物学特性良好,可被SPIO有效标记且不影响生物活性。2. 3.0T MRI联合动物专用线圈对SPIO标记的BMSCs活体示踪有意义。3.BMSCs可能对大鼠神经功能恢复有一定作用。
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