【摘 要】
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据此该实验将sTNFRⅡ与IgG Fc分子通过一个柔性连接肽偶联,构建一个IgG样的嵌合分子sTNFRⅡ-IgG Fc,人为地将sTNFRⅡ体外二聚化,在真、原核系统中进行了表达与纯化,研究该嵌
【出 处】
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中国预防医学科学院 中国疾病预防控制中心
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据此该实验将sTNFRⅡ与IgG Fc分子通过一个柔性连接肽偶联,构建一个IgG样的嵌合分子sTNFRⅡ-IgG Fc,人为地将sTNFRⅡ体外二聚化,在真、原核系统中进行了表达与纯化,研究该嵌合蛋白对hTNFα的抑制活性.同时还利用酵母双杂交技术从随机肽库中筛选hTNFα特异性结合肽,以期获得hTNFα特异性结合肽,以期获得hTNFα的小分子拮抗剂.主要研究内容和结果如下：一、可溶性人肿瘤坏死因子受体Ⅱ（sTNFRⅡ）和嵌合蛋白sTNFR Ⅱ-IgG Fc的基因克隆、表达与生物学活性研究;二、hTNFα特异性结合肽的筛选;综上所述,该实验从可溶性肿瘤坏死因子受体和特异性结合肽两个方面对拮抗hTNFα的生物学活性进行了研究,设计了一种具有自主知识产权的嵌合蛋白sTNFR Ⅱ-IgG Fc,并在真、原核系统中进行了表达,建立了重组蛋白的纯化工艺,该蛋白在天然状态下能够形成二聚体,拮抗hTNFα细胞毒活性的能力比单聚体的sTNFR Ⅱ有了显著的提高;同时利用酵母双杂交技术开展了hTNFα拮抗肽的筛选工作,获得了5个hTNFα特异性亲和肽.该工作为hTNFα拮抗剂的进一步研究开发奠定了基础.
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