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金黄色葡萄球菌（S.aureus）是一种细菌，经常可在人类的呼吸道以及皮肤上被发现，尽管并不总是致病性S.aureus，但却是皮肤感染、呼吸系统疾病和食物中毒的常见致病源，还是临床感染的重要性病原菌之一，危害性比较大，并且近年来的研究表明，由S.aureus引起的感染有明显的上升趋势，因此分析测定S.aureus具有很重要的临床和使用价值意义。S.aureus菌体蛋白可用酶联免疫法进行检测，但通常对S.aureus菌体蛋白的检测采用传统常用的方法如薄层色谱法、紫外分光光度法等，这些方法的灵敏度较低，对S.aureus的测定具有一定的局限性，因此作者希望建立一个对S.aureus的检测具有高灵敏度的检测方法。由于S.aureus菌体蛋白可以根据抗原与抗体的特异性与碱性磷酸酶联系起来，而碱性磷酸酶可以催化磷酸苯酯二钠二水（DPPD）进行水解，得到水解产物苯酚，DPPD对B-Z振荡体系不产生影响，而苯酚会对B-Z振荡体系产生干扰影响，引起振荡体系的振幅或周期发生变化，这样就把B-Z振荡体系与酶联免疫结合起来通过周期或振幅的改变量来最终检测S.aureus菌体蛋白浓度的改变。我们先设计出两个B-Z振荡体系，一个是H2SO4-C6H12O6-C3H6O-NaBrO3-[CuL](ClO4)2振荡体系，另一个是H2SO4-C4H6O5-NaBrO3-[CuL](ClO4)2振荡体系，分别对两个体系中的组分浓度进行优化，得到了对苯酚扰动响应最大，稳定性最好的一组体系浓度，结果为丙酮-葡萄糖体系：[H2SO4]=1.05mol/L，[NaBrO3]=0.08mol/L，[Acetone]=0.65mol/L,[[CuL](ClO4)2]=0.05mol/L，[Glucose]=0.06mol/L；苹果酸体系：[H2SO4]=1.05mol/L，[NaBrO3]=0.8mol/L，[Malic Acid]=1.5mol/L，[[CuL](ClO4)2]=0.03mol/L。用建立好的丙酮-葡萄糖体系检测碱性磷酸酶，根据振幅的变化量与浓度的关系，发现相关系数R=0.9984；对苯酚进行检测，R=0.9921；将丙酮-葡萄糖体系与双抗体夹心酶联免疫法结合测定S.aureus菌体蛋白，检测限是1.0597×10-9g/mL；将丙酮-葡萄糖体系与生物素-亲和素酶联免疫相结合测定S.aureus菌体蛋白，检测限达到1.4636×10-11g/mL。若用建立好的苹果酸体系检测碱性磷酸酶，根据振幅的变化量与浓度的关系，发现相关系数R=0.9905；对苯酚进行检测，R=0.991；将苹果酸体系与双抗体夹心酶联免疫法结合测定S.aureus菌体蛋白，检测限是1.239×10-10g/mL；将苹果酸体系与生物素-亲和素酶联免疫相结合测定S.aureus菌体蛋白，检测限达到1.356×10-12g/mL。由此可知两种B-Z振荡体系结合酶联免疫分析法都对S.aureus菌体蛋白的检测具有良好的线性相关关系以及较高的灵敏度。本文采用10mL的B-Z化学振荡体系，体系检测重复性和稳定性都很好，并且丙酮-葡萄糖振荡体系和苹果酸振荡体系对苯酚的检测相关性都很高，同时B-Z化学振荡体系结合酶联免疫分析法检测S.aureus菌体蛋白的浓度变化，这为检测S.aureus拓宽了思路，具有很重要的实际意义；除此之外，酶联免疫结合B-Z化学振荡分析检测法还可用于测定其他药物、大分子、小分子等的浓度变化，具有很大的使用范围，也为其他物质的检测提供了新方法。