透明颤菌血红蛋白基因在产TRAIL蛋白大肠杆菌中的克隆表达

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为解决大肠杆菌高密度发酵生产TRAIL蛋白过程中的供氧矛盾,有效提高发酵密度,在质粒pBV220-TRAIL中引入透明颤菌血红蛋白基因(vgb),构建出含有两种外源基因的新质粒。用此新质粒转化大肠杆菌C600并筛选转化子。摇瓶实验表明:转化子CTV2能在低溶氧和42℃诱导时同时表达TRAIL和VHb两种蛋白,且目标蛋白TRAIL占菌体总蛋白的比例与对照C600(pBV220-TRAIL)相比相差不大;CTV2的最高菌体密度高于对照1倍左右。3.7L发酵罐实验表明:CTV2菌体密度高出对照C600(pBV220-TRAIL)18.9%,而TRAIL占菌体总蛋白的13.8%,仍与对照(14.1%)相差不大。可见VHb基因在CTV2中发挥出了积极作用,通过增加发酵密度提高了TRAIL蛋白的产量。
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