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2001年初，江苏省一些鹅场发生了一种仅感染雏鹅的病毒性传染病，患病雏鹅以出血性坏死性肝炎为特征性的大体病理变化和显微病理变化。本教研室自发病鹅场中，采集患有“出血性坏死性肝炎”雏鹅的肝脾脏病料，分离到两株病毒，分别命名为WJ01-2G和LY01-3G。由于该病以前未见报道，为明确其病原，我们对其中一株病毒LY-（01-3）G进行了鉴定并对其特性作了初步研究。 实验证实该分离毒株通过绒毛尿囊膜途径接种适日龄鸡胚、鸭胚和鹅胚，均能引起规律性死亡和特征性病变，但病毒通过尿囊腔途径接种发育不良。分离株能适应鸡胚成纤维细胞、鸭胚成纤维细胞和鹅胚成纤维细胞，但初代无明显的细胞病变，在原代细胞上盲传5代后，鸡胚成纤维细胞和鹅胚成纤维细胞产生明显的细胞病变，感染细胞圆缩，胞膜折光度增强，细胞内颗粒增加；鸭胚成纤维细胞病变仍不明显。收集出现病变的鸡胚和鹅胚成纤维细胞冻融后，经绒尿膜接种鸡胚、鸭胚和鹅胚，均能致死并产生特征性病变。将适应细胞的病毒通过肌肉或爪垫注射雏鹅，复制到了与自然发病鹅相似的临床症状和病理变化，并回收到该病毒；接种1日龄雏鸡爪垫可引起注射部位炎性反应，但爪垫和肌肉注射雏鸡均不引起死亡；采取发病鹅肝脏、脾脏、胰腺、肾脏和脑等器官制作病理切片，对其微观病变进行了观察，发现这些器官的病变主要是组织局灶性坏死，其中以肝、脾尤为严重；耐过鹅血清可以抑制细胞病变的产生，与该毒株提纯抗原进行琼脂扩散试验，可产生清晰致密沉淀线。 感染细胞经吖啶橙染色，荧光显微镜下观察可见细胞浆内出现黄绿色荧光；而已知单股病毒对照呈现火红色荧光，双股病毒对照呈现绿色荧光。病毒经DNA代谢抑制物（5-溴脱氧尿嘧啶）处理后，感染力变化不明显。病毒耐酸耐热，对乙醚、氯仿、去氧胆酸盐等脂溶剂不敏感，胰蛋白酶处理后感染力增加，1M Mg2+可提高病毒的热稳定性；对多种动物的红细胞无凝集作用。病毒在禽胚尿囊液中含量较低，而在胚体和尿囊膜中含量较高。血清中和试验表明该病毒不能被小鹅瘟、新城疫和禽流感抗血清所中和，只能被自身特异性抗血清中和；交叉血清学试验表明该分离株与鸡呼肠孤病毒有一定的抗原相关性。用离子捕捉法处理病毒尿囊液，负染后电镜观察发现病毒粒子呈球形，无囊膜，有可见的双层衣壳结构，外壳直径75nm左右，内核直径50nm左右，呈二十面体对称。胚肝和绒尿膜的超薄切片观察表明，病毒在细胞浆内复制，病毒粒子呈圆形，无囊膜，大小为80扬州大学硕士论文nm左右。 根据病毒分离、动物试验、病毒形态结构的观察以及核酸类型的鉴定，可以判定该株病毒为呼肠孤病毒科成员。另外，理化特性和生物学特性表明该病毒具有禽呼肠孤病毒的基本特性，分类学上应属于禽呼肠孤病毒。 在初步完成对该毒株病原鉴定基础上，建立了用琼脂扩散试验检测病毒抗原及抗体的方法，运用该方法对感染死亡雏鹅肝脏样品及抗血清的阳性检出率分别达到70%和65%，琼扩效价最高分别达到25和24，说明琼脂扩散试验检测鹅出血性坏死性肝炎病毒抗原及抗体是一种简便、特异性较强、敏感性较高、易于判断的诊断方法，可用于临床上对种鹅群免疫状态的监测以及对本病的初步诊断。